黄晓童，黄春霞，胡宪文

(麻醉与围术期医学安徽普通高校重点实验室，安徽医科大学第二附属医院麻醉与围术期医学科，安徽 合肥 230601)

失血性休克是创伤导致患者死亡的重要原因之一，目前通常采用快速灌注液体的方法以迅速恢复循环血容量治疗失血性休克。当采取积极措施恢复机体血供时，脑组织因其较为脆弱会受到二次损伤，称之为脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury，CIRI)。有研究发现丙泊酚通过抑制凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor，AIF)介导的大鼠全脑的缺血/再灌注损伤(ischemia reperfusion injury，IRI)诱导的细胞凋亡，从而减轻CIRI[1]。沉默信息调节因子(silent information regulation 1，SIRT1)参与多种生物代谢活动，如炎症反应、细胞衰老与凋亡、氧化应激及肿瘤形成等[2-3]。有研究指出，Maresin-1治疗通过激活SIRT1信号来减少炎症反应和线粒体损伤，从而减轻CIRI[4]。我们前期研究结果发现，七氟醚后处理可能通过上调SIRT1和过氧化物酶体增殖物受体γ共激活因子-1α(peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator-1α，PGC-1α)降低氧化应激反应水平，从而对CIRI起到积极的保护作用[5]。然而基于SIRT1通路的七氟醚后处理脑保护作用的具体机制目前尚未有研究。本实验拟用特异性的SIRT1抑制剂研究SIRT1在七氟醚后处理小鼠失血性休克与复苏中的作用，以进一步探讨七氟醚后处理发挥脑保护作用的分子机制。

1 材料与方法

1.1 动物从安徽医科大学动物实验中心购买C57BL/6J小鼠(8-10周龄，♂)进行实验，动物使用许可证号是SYXK(皖)2017-006。

1.2 试剂七氟醚(艾伯维公司，83291)，EX527(美国Sigma公司，E7034-5MG)，TTC染料(美国Sigma公司,T8877)，BCA蛋白浓度测定试剂盒和RIPA(碧云天生物技术有限公司，P0012,P0013K),SIRT1抗体(Cell Signaling Technology,9475S)，Bax抗体(Cell Signaling Technology,2772S)，Bcl-2抗体(Cell Signaling Technology，3498S)，Cleaved-caspase-3抗体……