滴度及注射方式对2型腺相关病毒载体表达效果的影响
2021-03-10贾俊涛杜晨光
贾俊涛,王 昆,潘 登,李 强,杜晨光,*
(1.内蒙古农业大学 职业技术学院,内蒙古 包头014109;2.河北省农林科学院 粮油作物研究所,河北 石家庄 050000;3.内蒙古农业大学 兽医学院,内蒙古 呼和浩特 010018)
对有关发育、学习、行为和能量调控等相关神经网络的探索是生命科学的研究热点之一,其相关问题可以通过对某个特定神经元或核团的人为干扰或研究某一分子在神经回路中的影响来得到一定的解答。高度特异性和高效的方法是支撑这些研究成功的基础。腺病毒家族由不具有包膜的30~38 kb线性DNA组成[1]。根据其凝集特点可以将57个血清型分为A~G类[2]。由不同的血清型衍生而来的各种腺相关病毒载体(adeno-associated viral vector,AAV) 是一种可用于靶向和操纵神经系统内特定神经元亚型的强力工具[3]。在使用这种工具之前,有些问题应当重视,其包括但不仅限于:(1)如何运送AAV至指定区域;(2)使用何种基因调控元件;(3)选择何种血清型[4]。研究表明,脑立体定位注射是运送AAV至指定神经元或核团的常用方式[5];突触启动子(synapsin promoter)等强力启动子则是增强AAV在中枢神经系统中转导性的必备元件之一[6];2型腺相关病毒载体(adeno-associated viral vector serotype 2,AAV2)因其神经元特异性,长期以来被用于神经系统的相关研究当中[7]。因此,在神经学研究中,选择具有较强启动子的AAV2运载外源基因、通过脑立体定位注射到指定核团则有利于试验的顺利进行。本试验选择AAV2-CMV-EGFP对照载体进行研究正是基于以上原因。
通过对外源的转录、翻译,AAV可将特异神经元跨突触信号传递情况直观反映出来[8]。……
