石永泉，刘炜，王柯

（1.大连医科大学基础医学院，辽宁 大连 116044；2.大连医科大学附属第一医院中医科，辽宁 大连 116011；3.大连医科大学附属第二医院临床营养科，辽宁 大连 116023）

肝切除术术后肝衰（post hepatectomy liver failure，PHLF）发生率约为28%，死亡率约为27%，远高于非PHLF患者的死亡率[1]。良好的肝再生是PHLF恢复的重要因素，稳定的能量供应对肝再生至关重要，线粒体嵴膜（cristae membrane，CM）锚定的呼吸链复合体是能量（ATP）生成的主要装置。CM形态可决定ATP合成效率[2]。Mic60和OPA1是主要的CM形态调控蛋白[3]，其表达水平的变化与多种病理生理状态相关[4-6]。目前，关于肝再生中Mic60和OPA1与ATP供应的关系的研究较少。本研究旨在观察残余肝组织Mic60 和OPA1水平与ATP含量的关系，为改善PHLF预后提供新思路，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料 C57/6J SPF雄性10周龄WT小鼠购自大连医科大学SPF中心。体视显微镜（wf10/20，宁波永新）；七氟烷（上海恒瑞）；Mic60（ab110329，Abcam）；OPA1（ab157457，Abcam）；HRP 标记山羊抗兔 IgG（#31460，thermoFisher）；COX IV（WL01794）、PCNA（WL02208）、兔抗小鼠IgG-HRP（WLA024）、羊抗兔IgG-HRP（WLA023）、线粒体蛋白提取试剂盒（WLA034a）、BCA 试剂盒（WLA004）购自万类生物；DAB 显色液（DA1010，Solarbio）；增强型ATP检测试剂盒（S0027，碧云天）。

1.2 方法

1.2.1 PH模型 PH模型制作在体视显微镜下完成。课题组前期发现70%PH小鼠7 d生存率可达100%，85%PH组的生存率也很高，因此，本实验选择85%PH作为起始切除比例。将小鼠随机分为对照组（Sham）、85%PH 和 90%PH 组，每组 18 只，每组10只用于生存分析。术前过夜不禁食水。七氟烷持续性吸入式麻醉。手术方法：腹部正中纵行切口，长约2～2.5 cm，暴露整个上腹部。显微剪离断镰状韧带、肝胃韧带、左外叶与右侧膈肌韧带，游离肝左外叶和肝中叶，5-0 慕丝线结扎中叶、左外叶和右下叶后切除。离断肝周韧带游离整个尾叶。……