沈留红，张 钺，尤留超，朱颍琨，石 湉，董 可，曹随忠*

（1.四川农业大学动物医学院，成都 611130；2.成都市动物疫病预防控制中心，成都 610041；3.四川育强本草生物技术有限公司，成都 611130）

胎盘组织含有多肽、激素、免疫球蛋白、环肽、甾体和氨基酸等生物活性成分[1-2]，具有抗氧化、抗疲劳和促免疫等作用[3-4]。中医将其蒸煮干燥并碾碎入药，近年来学者通过改变蒸煮条件和优化炮制工艺等方式有效提高胎盘制品生物学活性和总物质含量[5]，但难以获取成分种类单一胎盘制剂。因此，胎盘多肽成为目前胎盘活性成分研究热点之一。研究表明，多种动物胎盘均具有以酶解法制备生物活性多肽潜力[6]，可获取成分种类单一、作用方式确定胎盘多肽，提高胎盘制剂生物安全性[7-8]。目前，酶解胎盘制备活性多肽研究主要集中在活性提升，但最高活性酶解条件提取率低[9]，应结合酶解产物活性和提取率综合优化。奶牛胎盘作为分娩副产物，来源广泛，含有多种天然活性多肽[10]，目前尚未见酶解制备多肽及其提取率优化研究。本研究通过木瓜蛋白酶和胃蛋白酶酶解奶牛胎盘制备还原性多肽，分析各因素对其还原性多肽提取率和还原力的影响，探究最佳提取条件，并以每克胎盘提取多肽的还原力作为综合提取率，进一步作响应面优化并验证，以期获得具有较高还原活性和提取率奶牛胎盘多肽，为其临床开发应用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

采集规模化奶牛场自然分娩脱落健康中国荷斯坦奶牛新鲜胎盘若干，立即使用生理盐水清洗，除去胎盘内残留血液及污物，至胎盘子叶呈粉红色，于-20℃冰柜保存。……