刘 娜， 蒋 森， 蔡 倩， 钱小娟， 张 杨， 杨新玲

帕金森病(Parkinson’s disease，PD)是一种老年性神经退行性疾病。临床表现包括典型的运动症状和非运动症状，认知障碍是PD常见的非运动症状之一[1]。骨骼传统上是一个支持躯体运动以及保护内脏器官的结构，近年来也被认为是一个内分泌器官，其分泌的骨源性因子参与阿尔茨海默病(Alzheimer’s diease，AD)、急慢性肾脏疾病、多发性硬化(multiple sclerosis，MS)以及PD等多种疾病的发病[2～5]。其中骨桥蛋白(Osteopontin，OPN)、骨保护素(Osteoprotegerin，OPG)及骨钙素(Osteocalcin，OCN)等骨性蛋白不仅与PD的运动症状相关，同时部分骨性蛋白可能参与非运动症状中认知功能障碍的发病[5～7]，但目前相关研究甚少。因此本研究进一步探讨PD患者血清OCN、OPN、OPG水平与运动功能障碍、疾病严重程度及认知功能的关系，为骨性蛋白参与PD发病机制提供基础依据，同时为PD认知障碍的诊治提供新策略。

1 资料和方法

1.1 一般资料 选择2020年12月-2021年6月就诊于新疆医科大学第二附属医院的52例PD患者，符合英国PD协会脑库的诊断标准[8]，明确临床诊断。满足以上诊断标准的患者需排除：(1)帕金森叠加综合征及继发性帕金森综合征;(2)现服用影响骨代谢的药物，如糖皮质激素;(3)合并骨代谢性疾病，如甲状旁腺功能亢进症;(4)合并影响免疫功能的疾病，如自身免疫性疾病、急慢性感染性疾病、肿瘤;(5)合并AD、神经精神疾病、血管性痴呆等影响认知功能的疾病;(6)心、脑血管疾病，肝、肾功能不全危及生命，不能配合者。52例患者中男性23例，女性29例，年龄47～90岁，平均年龄(65.1±10.55)岁，合并基础疾病，高血压16例，糖尿病6例。具有饮酒史5例，吸烟史11例。纳入同期就诊于新疆医科大学第二附属医院36例健康体检者，其中男性18例，女性18例，年龄49～89岁，平均年龄(62.17±8.93)岁，合并基础疾病，高血压11例，糖尿病6例。具有饮酒史7例，吸烟史6例。两组在一般资料差异无统计学意义(P>0.05)。本研究通过医院伦理委员会批准，获得研究对象同意，并签署知情同意书。

1.2 方 法

1.2.1 量表评估及分组 PD认知功能采用蒙特利尔认知评估量表(Montreal Cognitive Assessment Scale)进行评估，若受教育年限≤12 y则在最终量表测试评分上加1分以校正分数，满分30分，≥26分为正常。根据MOCA评分进行分组：<26分的为PD认知障碍组，≥26分为PD认知正常组。同时进行Hoehn and Yahr(H-Y)分期及UPDRS Ⅲ评分进一步评估病情。

1.2.2 血清学检查 各组均于晨空腹时，经肘静脉抽血5 ml，4 ℃，5000 r/min，离心10 min，收集血清置于-80 ℃冰箱备用。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定OPN、OPG及OCN的水平(试剂盒均购于上海江莱生物科技有限公司)。

2 结 果

2.1 PD组与对照组血清OPN、OPG、OCN水平比较 PD组血清OPN、OCN水平高于对照组，OPG水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)(见表1)。

2.2 PD组血清OPN、OPG、OCN水平与HY分期、UPDRSⅢ评分的相关性 Spearman分析显示，PD组血清OPN水平与H-Y分期、UPDRSⅢ评分呈正相关(r=0.281、0.282，P均<0.05);PD组血清OCN水平与H-Y分期、UPDRSⅢ评分呈正相关(r=0.283、0.312，P均<0.05)，血清OPG水平与H-Y分期、UPDRS Ⅲ评分无相关性(P>0.05)。

2.3 影响PD伴认知障碍的单因素分析 PD认知正常组在年龄、病程、H-Y分期、UPDRSⅢ评分、血清OPN水平等方面均低于PD认知障碍组，受教育年限高于PD认知障碍组，差异有统计学意义(P<0.05)。两组在性别、吸烟、饮酒、糖尿病及高血压的发生率、血清OPG及OCN水平方面无统计学意义(P>0.05)(见表2)。

2.4 影响PD伴认知障碍的多因素分析 以PD有无认知障碍为因变量，以OPN、年龄、受教育年限、病程、H-Y分期、UPDRS Ⅲ评分为自变量，进行非条件Logistic回归分析，结果显示年龄及OPN与PD认知功能障碍相关(P<0.05)(见表3)。

2.5 PD患者血清OPN、OPG及OCN水平与MOCA评分及相关认知领域的相关性分析 PD组血清OPN水平与MoCA评分、注意力、计算力以及抽象思维呈负相关(P<0.05);PD组血清OCN水平与延迟回忆呈正相关(P<0.05)，而血清OPG与MoCA及其他认知领域均无相关性(P>0.05)(见表4)。

表1 PD组与对照组血清OPN、OPG、OCN水平比较

表2 影响PD伴认知障碍的单因素分析

表3 影响PD伴认知障碍的多因素分析

表4 PD组血清OPN、OPG、OCN水平与MoCA评分及相关认知领域的相关性分析

3 讨 论

PD是以运动障碍为主要表现的神经退行性疾病，随着疾病的恶化可出现认知功能受损，增加患者生活负担。有研究表明，骨性蛋白与疾病的运动障碍及认知功能的发生均相关，因此可为疾病的诊治提供新的切入点。

OPN是一种高度磷酸化的糖蛋白[9]，在PD中可能起到双重作用，一方面可通过抗炎、抗凋亡、以及诱导活化细胞增殖等方面，对PD起到神经保护作用[10,11]；但另一方面，可能加速PD的进展恶化。有研究显示，OPN结构中含精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)的肽片段通过减少神经胶质细胞的激活，减少炎症反应，从而保护酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞免受1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)毒性诱导死亡，而TH则是DA生物合成途径的关键酶[12]。而Maetzler等人发现，OPN敲除的PD小鼠模型中DA神经元损失较少以及神经胶质反应降低，表明OPN对PD具有神经损伤作用，且在PD患者脑脊液(cerebrospinal fluid，CSF)中发现，OPN水平与痴呆呈正相关，并推测导致认知功能下降的原因可能是OPN与PD中DA神经系统以外的神经元损伤有关，如海马区域的神经元[6]。

本研究中提示，PD组血清OPN水平显著高于对照组，同时与H-Y分期及UPDRS Ⅲ评分呈正相关，与以往研究相一致[5]，提示高水平的血清OPN，可能加速PD疾病的进展，并且可评估PD疾病严重程度。本研究同时发现PD认知障碍组血清OPN水平显著高于认知正常组，且与MoCA评分、注意力、计算力以及抽象思维方面呈负相关，同时进行多因素分析后，发现血清OPN水平仍与PD认知障碍相关，表明OPN可能为PD伴认知障碍的危险因素。表明高水平的OPN可能参与PD伴认知障碍的发病过程，并且可能与CSF水平具有一致性[6]，其具体机制有待明确。

OCN是一种成骨细胞中特异性表达的分泌蛋白，不仅可以调节骨的矿化过程，同时作为内分泌激素，在脑干、丘脑和下丘脑中积累，影响各种神经递质的合成和信号传导[13,14]。OCN参与PD的炎症反应，有研究发现PD患者外周血中的OCN水平与C-反应蛋白和HY分期相关，表明炎症可能是OCN与PD进展之间的潜在桥梁[5]。OCN在PD中具有保护作用，其在PD动物模型中通过AKT/GSK3β信号通路减轻炎症反应对DA神经元的损伤，从而纠正运动功能障碍[7]。

OCN与认知功能有一定关系，OCN缺乏的小鼠表现出明显的焦虑行为及认知障碍，外源性给予OCN可改善小鼠的认知功能[15]，但OCN与PD中认知障碍的研究较少。在本研究表明，PD患者血清OCN较对照组有所升高，与既往研究相一致[5]，但既往研究发现PD患者CSF中OPN下降，可能是OCN在中枢系统与外周中对于PD存在不同作用机制所致，但具体机制还需进一步探索。血清OCN与PD患者HY分期及运动症状呈正相关，提示其与PD运动症状相关，同时可对疾病严重程度进行评估。在PD认知方面，仅与MoCA量表中延迟回忆呈正相关，且血清OCN越低，延迟回忆能力越差，表明OCN可能与PD认知功能相关。鉴于OCN可对认知功能有改善作用，因此需进一步扩大样本量以明确OCN与PD认知功能的关系。

OPG是一种糖蛋白，成骨细胞合成，在骨骼、血管和免疫生物学中起着关键作用[16]。OPG主要通过RANKL/RANK/OPG(RRO轴)，参与中枢神经系统炎症反应，主要通过小胶质细胞及巨噬细胞作用，参与疾病的发生过程[17]。目前对于PD中血清OPG水平的研究结果有一定差异，Alrafiah等人纳入26例PD患者，发现PD患者血清OPG水平高于对照组[18]；一项纳入250例PD患者的研究显示，PD血浆及CSF中OPG较对照组有所下降[5]。而本研究中结果表明，PD患者血清OPG较对照组显著下降，但与疾病严重程度及认知功能未有明确相关性，表明低水平OPG可能参与PD疾病的发病过程。

综上所述，血清骨性蛋白OPN、OPG、OCN可能参与PD的发病过程，其中OPN、OCN不仅可以评估疾病严重程度，同时可能参与PD认知障碍的发病过程。同时本研究存在以下不足，纳入的样本量较小，且仅研究外周血中骨性蛋白的水平，而PD是一种中枢神经系统疾病，因此不能直接说明骨性蛋白对于中枢系统的作用，以及量表的评估主观性过强等局限性因素。