大蒜素抑制胃癌细胞上皮-间质转化作用及其机制*
2021-03-08徐丹李瑞阳李晶王儒涵兰婷巩平
徐丹,李瑞阳,李晶,王儒涵,兰婷,巩平
(石河子大学医学院第一附属医院肿瘤内科,石河子 832000)
胃癌(gastric carcinoma,GC)是最常见的恶性肿瘤之一[1],由于胃癌高侵袭性及高转移性,大多数患者确诊时已属晚期。研究发现[2],上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)能使细胞获得侵袭、转移特征。大蒜素(allicin)是从大蒜中提取的挥发性油状物,其主要化学成分二烯丙基三硫化物(diallyl trisul fidc,DATS)是大蒜素发挥抗癌活性的主要物质[3]。有报道显示,大蒜素对宫颈癌、结肠癌等多种肿瘤均有明显抑制作用[4],是理想的抗肿瘤药物。本研究以白细胞介素6(IL-6)体外诱导胃癌细胞系,构建胃癌细胞EMT模型,观察大蒜素对其E-钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)及核因子κB P65 (NF-κB P65)表达的影响。
1 材料与方法
1.1材料 人胃癌细胞株HGC-27(中国科学院细胞库,目录号:TCHu 22) ;大蒜素注射液(Solarbio,规格:每瓶20 mg,批号:SA8720);重组人IL-6(美国Peprotech公司,批号:031316-1) ;青链霉素混合液( Solarbio,批号:20170720),RPMI1640培养基[塞默飞世尔(苏州)生物化学制品有限公司,批号:8117196];二甲基亚砜(Solarbio,批号:520C0318) ;胎牛血清(fetal bovine serum,FBS,美国Gibco公司,批号:10091-148) ;Transwell试剂盒(美国康宁公司,批号:23317042);CCK-8试剂盒(日本同仁化学研究所,批号:KS607);Matrigel matrix(美国康宁公司,批号:7156009);无菌超净工作台(上海力新公司);二氧化碳(CO2)培养箱(美国ThermoScientific公司);显微镜(日本奥林巴斯公司);离心机(德国Eppendorf公司);7500 FastReal-TimePCR system(美国AB公司)。
1.2方法
1.2.1细胞的培养 人胃癌细胞株HGC-27培养于含10%FBS、青链霉素混合液(×100)RPMI-1640培养基,37 ℃、5%CO2饱和湿度条件下培养箱培养。细胞70%~80% 融合时以胰蛋白酶消化传代,每2或3 d传代1次。共分为4组:空白对照组,培养胃癌细胞HGC-27,不作任何处理;IL-6组,常规培养胃癌细胞HGC-27,加入50 ng·mL-1IL-6培养72 h;大蒜素组,常规培养胃癌细胞HGC-27,加入3 μg·L-1大蒜素培养48 h;……
