李文俊, 姜丽琼, 刘琼, 肖前刚, 浣杰, 徐志萍, 杨洪燕

成都市农林科学院，四川 成都 611130

白及[Bletilla striata(Thunb.) H.G.Reichenbach]是兰科白及属的多年生草本植物[1]，主要分布在云南、四川和贵州等地[2]，白及具有广泛的药用价值及园林价值，白及以根茎入药，具有收敛止血、消肿生肌等功效，是我国重要的中药材[3]，亦可作为盆栽室内观赏，点缀于较为荫蔽的花台、花境或庭院一角[4]。此外，白及亦是装裱书画的高品质粘合剂，并广泛应用于高档美容化妆品及保健等行业[5]。

白及属植物种间和种内遗传分化强烈[6]，本研究在白及资源调查和收集过程中，发现白及表型变异程度较大，主要表现在株型、花型、花色、花期、花量、花茎、叶片形态、托叶宿存情况及托叶大小及抗逆性等方面，花色有白色、淡粉色、粉紫色、紫色、深紫色等，开花时间主要在3—5月之间变化，叶片形态存在宽窄差异，从表型看，白及种内差异较大。

nrDNA ITS序列是位于真核生物nrDNA18S和26S之间的内含子[7]，由于进化中的选择压力小，nrDNA ITS片段在物种水平的变异较快，有更多的突变位点以区分不同的物种，常用于物种鉴定和系统进化研究[8]。而在兰科植物中，Kurt[9]等指出兰科植物的ycf1（Hypothetical chloroplast openreading frame 1）基因具有高度变异性，并比matK基因更具有可靠的变异信息位点。本研究收集来源于四川和云南的30个白及单株，克隆并分析其nrDNA ITS序列和叶绿体ycf1序列的差异基因，以期为白及遗传分化研究鉴定提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 样品采集

在四川和云南采集白及野生种和栽培种共30个样本，样本植株移栽在成都市农林科学院科研基地，试验时选择成熟个体，取无病虫害的叶片立即放在液氮中，-80 ℃保存待用（见表1）。……