张冬姣，徐浩

哮喘个体免疫反应的改变可归因于遗传和表观遗传的改变[1-2]。MicroRNAs(miRNAs)是基因表达的转录后调节因子，在发育和炎症性疾病中受到不同的调节[3-4]。在过敏性气道疾病中，miRNAs的作用可以明显影响全身炎症反应和组织反应[5]。本研究利用动物模型来探讨miRNAs在哮喘发病机制中的作用，希望进一步了解miRNAs在哮喘中的特定作用。

1 材料方法

1.1 动物 选取6～8周龄，体质量18～20 g的BALB/c小鼠24只[SYXK(辽)2010-0002]，按随机数字表法分为正常对照组、卵清蛋白处理组、地塞米松治疗组各8只。

1.2 给药方法 (1)正常对照组：在饲养的第1、7、14天使用200 μL含1 mg的氢氧化铝的磷酸盐缓冲液(phosphate belanced solution，PBS)作为佐剂注射，第22～25天通过鼻腔吸入的方式给予小鼠鼻内吸入20 μL的PBS。(2)卵清蛋白处理组：在饲养的第1、7、14天使用20 μg乳化的卵清蛋白+200 μL含1 mg的氢氧化铝的PBS作为佐剂注射，第22～25天通过鼻腔吸入的方式给予小鼠鼻内吸入20 μL含有100 μg的卵清蛋白的PBS。(3)地塞米松治疗组：在饲养的第1、7、14天使用20 μg乳化的卵清蛋白+200 μL含1 mg的氢氧化铝的PBS作为佐剂注射，第22～25天通过鼻腔吸入的方式给予小鼠鼻内吸入20 μL含有100 μg的卵清蛋白的PBS，并且给小鼠腹腔注射2 mg/kg的地塞米松。

1.3 肺泡灌洗液的收集 实验完成后使用戊巴比妥钠麻醉小鼠，随后颈椎脱臼法处死小鼠。剖开颈部并暴露气管，夹住远端气管，将滞留针插入气管中；使用1 mL注射器吸0.8 mL预冷的PBS，通过滞留针缓慢注射于肺中，并轻柔按摩肺部10 s后吸出；将两次收集的灌洗液离心，1 500 r/min，离心10 min，离心半径6 cm，将上清储存于-80 ℃冰箱待用。

1.4 炎症细胞的计数 使用血细胞分……