文/萧婷婷 吴 颖 陈方圆 刘 内

（湖南欧比佳营养食品有限公司）

双歧杆菌是从婴儿粪便中分离出来的一种革兰氏阳性专性厌氧菌，是人体重要的益生菌，可以有效调节婴幼儿肠道微生态，具有改善喂养不耐受，增强婴幼儿机体免疫力的功能，能有效预防和治疗腹泻并缓解过敏症状[1～5]。

婴儿配方奶粉中双歧杆菌活菌存活率受温度、水分活度等因素影响，活菌数会随着储存时间的增长而下降[6～8]，从而影响产品货架期。《GB 10765—2010食品安全国家标准 婴儿配方食品》规定添加益生菌的婴幼儿配方食品在货架期内活菌数要≥1.0×106CFU/g[9]。现市售奶粉货架期大多为两年，目前对于双歧杆菌在奶粉中的稳定性研究试验周期均较短[6～8，10]，对于双歧杆菌奶粉产品货架期内产品稳定性还需要进一步的研究。本文将添加定量动物双歧杆菌Bb-12的婴儿配方奶粉放置在不同的存储环境中进行6 个月的加速试验和24 个月的长期试验，通过测定水分含量、水分活度和活菌数，研究货架期内活菌数的稳定性情况，为添加双歧杆菌的产品货架期的确认提供依据。

1 材料与方法

1.1 原料

菌种：动物双歧杆菌Bb-12购自丹麦科·汉森有限公司，活菌数≥3.0×1010CFU/g。

婴儿配方奶粉：800 g充氮罐装（残氧量≤3%），其中动物双歧杆菌Bb-12添加量为500 mg/kg。

培养基：MRS培养基。

1.2 主要仪器设备

恒温恒湿箱、电子天平、厌氧培养箱、无菌超净工作台、水分活度测定仪、电热恒温干燥箱。

1.3 检测方法

1.3.1 活菌数的测定

取25 g奶粉到225 mL无菌稀释液混匀，制成1：10的样品匀液。取1 mL之前配制的1：10样品匀液到9 mL无菌稀释液中，混匀成1：100的样品匀液，如此制备10 倍系列稀释样品匀液。……