康 超，郝 督，简思杰，荣 娜，刘 祥*，丁 锐

(1.陕西理工大学 生物科学与工程学院 中德天然产物研究所， 陕西 汉中 723000；2.甘肃新希望六和农牧有限公司， 甘肃 兰州 730000)

3-羟基苯乙酸、4-羟基苯乙酸、3,4-二羟基苯乙酸是3种重要的化工中间体，广泛用于医药、染料、农药等领域[1]。其中，4-羟基苯乙酸被认为是一种潜在的高渗、缺氧的抑制剂[2]，具有抗焦虑[3]、抑菌和防治肺水肿活性特性[4]。3-羟基苯乙酸和3,4-二羟基苯乙酸是神经递质的内源性代谢物[5]，经小鼠静脉注射后均表现出抗焦虑活性。细胞色素P450酶系是代谢内源性(激素)和外源性化合物(药物、农药)的混合功能氧化酶，是肝脏重要的Ⅰ相代谢酶系，引起人体一系列的药代动力学变化，负责90%药物的代谢和多种外源化合物的代谢，可用作药物之间相互作用的预测[6-8]。因此CYP450酶常用于药物代谢情况的评价。

本研究应用大鼠肝微粒体孵育法和Cocktail探针法，与美国食品药品监督管理局(Food and Drug Administration，FDA)推荐的探针底物[9]非那西丁、甲苯磺丁脲、氯唑沙宗和睾酮在体外孵育后，利用液相色谱技术评价不同羟基位点苯乙酸对大鼠主要的CYP450酶系4种亚型CYP1A2、CYP2C9、CYP2E1和CYP3A4的体外抑制作用，以期探讨不同羟基位点苯乙酸的代谢差异，为新药合成奠定基础。

1 实验材料

1.1 实验试剂

3-羟基苯乙酸(货号B24111)、4-羟基苯乙酸(货号B30104)和3,4-二羟基苯乙酸(货号B21788)，均为分析标准品，购于上海源叶生物科技公司，HPLC纯度≥98%；非那西丁、甲苯磺丁脲、氯唑沙宗、睾酮(上海源叶生物科技公司，纯度≥98%)；还原辅酶Ⅱ四钠盐(NADPH，批号S10103)、色谱甲醇、色谱乙腈(纯度≥99.5%)均购于天津市大茂化学试剂厂；……