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苹果壳色单隔孢溃疡病菌TaqMan实时荧光PCR 检测方法

2021-03-02林惠娇牟桂萍滕少娜张海鹏周而勋

华南农业大学学报 2021年2期
关键词:检测

林惠娇,牟桂萍,滕少娜,张海鹏,周而勋

(1华南农业大学植物保护学院/广东省微生物信号与作物病害防控重点实验室/农业部华南作物有害生物综合治理重点实验室,广东广州510642;2黄埔海关,广东广州510730;3重庆海关,重庆401147)

苹果壳色单隔孢溃疡病(Diplodiacanker)的病原菌为史蒂芬葡萄座腔菌Botryosphaeria stevensii,异名Physalospora mutila,无性态Diplodia mutila[1-2],是我国禁止入境的重要检疫性有害生物[3]。其寄主范围非常广泛,可为害苹果Malusspp.、梨Pyrusspp.、李Prunusspp.、葡萄Vitisspp.、栎Quercusspp.、棕榈Trachycarpusspp.等多达11科18属的重要经济植物[4]。根据国际应用生物科学中心(https://www.cabi.org/cpc)公布的相关信息,目前苹果壳色单隔孢溃疡病分布的国家有美国、加拿大、秘鲁、澳大利亚、新西兰、智利、意大利、西班牙、德国、法国、英国、波兰、摩洛哥、匈牙利、葡萄牙、保加利亚、南非、印度等,在我国无分布[5]。该病菌可引起苹果和梨重要的枝干和果实病害,主要导致叶片黄化枯萎,引起枝干溃疡干枯,还可引起果实腐烂,在其他阔叶树上也可引起类似的症状[1,6]。病菌分生孢子在生长季节可通过风雨或昆虫传播[7],也可随原木、苗木及果实的调运进行远距离传播[8]。该病菌通过贸易进行跨国异地传播的风险极高,一旦传入将对我国水果产业造成很大的威胁。

准确、快速地进行物种鉴定是防止外来有害生物入侵的首要环节。由于葡萄座腔菌属Botryosphaeria真菌的有性态在自然环境和培养条件下都很难产生,而其无性态的形态特征多有重叠且不稳定,因此该属的形态分类鉴定十分困难[9-11]。通过核糖体DNA 序列的分析比较进行种类鉴定已被广泛应用于这一真菌类群[2,12-14]。……

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