李志超，张广昊，黄 雁，陈 明

(大连工业大学 生物工程学院,辽宁 大连 116034)

0 引 言

脂糖肽抗生素A40926是抗感染新药Dalvance的合成前体[1-2]，由野野村放线菌(Nonomuraeasp.)ATCC 39727代谢生成[3-4]。A40926为A0、A1、B0、B1等组分构成的复合物，化学结构上与替考拉宁相似，均含有交联七肽骨架、两个氯原子、一个甘露糖和一个脂酰氨基葡萄糖酸，但各组分连接的疏水脂酰侧链不同[5-6]。研究表明，脂酰侧链能大大提高A40926的抑菌活性[7]。

然而，A40926生物合成基因簇中并不含合成脂酰侧链的基因[8]。Beltramatti和Jovetic等[9-10]研究了培养基中添加支链氨基酸对野野村放线菌细胞脂肪酸和A40926各组分比例的影响，发现A40926各组分比例与生产菌细胞脂肪酸组成在变化趋势上存在一致性，推测细胞脂肪酸经β-氧化后生成A40926的脂酰侧链，而支链氨基酸则作为细胞脂肪酸合成的前体物。

Wallace等[11]研究了3种放线菌细胞直链、支链脂肪酸生物合成的起始物，认为放线菌支链脂肪酸的生物合成以异丁酰CoA(对应生成偶数碳的iso-脂肪酸)、3-甲基丁酰CoA(对应生成奇数碳的iso-脂肪酸)、2-甲基丁酰CoA(对应生成奇数碳的anteiso-脂肪酸)为合成起始物，直链脂肪酸的合成以丁酰CoA(对应生成偶数碳的n-脂肪酸)、丙酰CoA(对应生成奇数碳的n-脂肪酸)为合成起始物。Nonomuraeasp.ATCC 39727作为一种新发现的放线菌，对其生物特性研究较少[12]。本实验对该菌利用短链羧酸合成细胞脂肪酸进行了研究。

1 材料与方法

1.1 材 料

1.1.1 菌 种

Nonomuraeasp.ATCC 39727，实验室保藏。

1.1.2 培养基

培养基ISP2(g/L)：葡萄糖4.0，酵母提取物4.0，麦芽提取物10.0，琼脂20.0，pH 7.0。

培养基P150(g/L)：葡萄糖20，(NH4)2SO43.65，KH2PO40.3，MgSO4·7H2O 0.45，CaCO35，每升加入3 mL微量元素液(g/L，FeSO4·7H2O 5，CuSO4·5H2O 0.39，ZnSO4·7H2O 0.44，MnSO4·H2O 0.15，CuCl20.02，NaMoO4·2H2O 0.011，50 mL 37% HCl)。

培养基P150中分别添加短链羧酸(丙酸、丁酸、异丁酸、2-甲基丁酸、3-甲基丁酸)，质量浓度0.3 g/L。……