王 晶，陈心怡，邓玉莹，王慧慧，谢雪晴，王春梅

(北京中医药大学 生命科学学院,北京 100029)

土鳖虫[1]为鳖蠊科昆虫地鳖(EupolyphagasinensisWalker)或冀地鳖(Steleophagaplancyi(Boleny))的雌虫干燥体[2]，味咸性寒，有小毒，归肝经，具有破血逐瘀、续筋接骨之功效。土鳖虫用于治疗骨折具有悠久的历史，最早记载于《神农本草经》。我国2015年版药典[1]中含有土鳖虫的处方共有29份，其中14份处方用于治疗跌打损伤，且药效显著。程爵棠先生编写的《虫蛇妙方》[3]中记载，土鳖虫用于治疗骨折的验方，治愈率均在70%以上，由此可见土鳖虫治疗骨折愈合临床疗效明确。土鳖虫通过对骨生长因子的调控、改善血液循环、提高成骨细胞活性等加速骨折愈合。现代研究表明，土鳖虫中含有蛋白质、氨基酸、核苷酸、脂肪酸、生物碱和脂溶性维生素等多种化学成分[4]。但是关于土鳖虫促进骨折愈合的有效成分尚不清楚，MC3T3-E1成骨细胞系是作为体外研究成骨细胞模型的成熟细胞模型[5]，因此，笔者采用多种提取方式获得土鳖虫成分，研究其对促进MC3T3-E1成骨细胞增殖活性成分的溶解性及对温度的敏感性，为后续继续深入研究土鳖虫促骨折愈合的活性成分提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 药品

土鳖虫购自安徽亳州药材市场，经北京中医药大学中药鉴定系杨瑶君教授鉴定为鳖蠊科昆虫地鳖Eupolyphagasinensis的雌虫干燥体。

1.1.2 细胞

小鼠胚胎成骨细胞前体细胞 MC3T3-E1，由中国科学院过程工程研究所生化实验室张贵峰研究员馈赠，常规培养于含10%胎牛血清的MEM培养基中，置培养箱于5%CO2、37 ℃湿化条件下培养，取对数生长期细胞进行实验。……