王慧，吕懿，李玲，李朝菲，郭璨璨，田凤㛃，穆箭兵，郑金平,3

1.山西医科大学公共卫生学院卫生毒理学教研室，山西 太原 030001

2.美国国立卫生研究院，马里兰州 贝塞斯达 20892

3.长治医学院公共卫生与预防医学系，山西 长治 046000

苯并［a］芘（benzo［a］pyrene，BaP）是生产与生活环境中的主要污染物之一，我们的前期研究发现，职业暴露于BaP的焦炉工人表现出以通气功能障碍为主的肺功能损伤［1］，可能与肺部的炎症反应和氧化应激相关。近年来多项有关BaP毒性机制的研究也证明，用BaP或其在体内形成的活性代谢产物二羟环氧苯并 芘（7，8-dihydrodiol-9，10-epoxidebenzo［a］pyrene，BPDE）染毒细胞，4～24 h即可引起细胞信号转导紊乱、细胞周期异常、能量代谢异常以及氧化损伤，最终导致细胞的生存率明显下降［2-3］。BaP可能通过直接作用和在体内形成活性代谢产物BPDE两种途径引起肺损伤。因此，深入研究BPDE引发细胞急性损伤的分子机制，能为提出早期防控措施提供线索。本研究通过BPDE短期暴露细胞模型，在转录组水平观察BPDE对人支气管上皮细胞（16HBE细胞）基因表达的影响，为进一步探讨BaP致肺损伤的毒性机制提供依据。

1 材料与方法

1.1 细胞培养与分组

将16HBE细胞（中国广州吉妮欧）加入细胞培养基培养于37℃、5% CO2的培养箱中。细胞培养基由89%最低必需培养基（minimum essential medium，MEM；美国Gibco），10%胎牛血清（fetal bovine serum，FBS；中国武汉普诺赛） 和1%的青链霉素混合液（中国武汉普诺赛）配置而成。BPDE（加拿大Toronto Research Chemicals）呈黄色固体状，纯度为95%，溶解于有机溶剂二甲基亚砜（dimethylsulfoxide，DMSO；中国北京索莱宝）作为母液，待细胞生长达80%时分为实验组（终浓度为0.5、1.0、2.0、4.0 μmol·L-1BPDE）和溶剂对照组（等体积DMSO，终浓度≤0.1%）及空白对照组（正常培养基），处理24 h后，用CCK8法检测细胞存活率。……