非洲猪瘟病毒p22 蛋白的表达及单克隆抗体制备
2021-02-16颜世君郝丽影白露露郑丁丁宋欢欢李胜强王同燕谭菲菲邓均华田克恭
颜世君,郝丽影,白露露,郑丁丁,宋欢欢,李胜强,王同燕,谭菲菲,邓均华,田克恭,
(1. 国家兽用药品工程技术研究中心,河南 洛阳 471000;2. 普莱柯生物工程股份有限公司,河南 洛阳 471000;3. 洛阳普泰生物技术有限公司,河南 洛阳 471000)
非洲猪瘟病毒是非洲猪瘟病毒科的唯一成员,具有高度传染性,感染后可导致家猪高烧、出血性病变、发绀、厌食,甚至死亡[1-3]。该病毒起源于非洲,随后从非洲传到欧洲,后来又传到南美洲和加勒比地区[4-5],2018 年传至中国并在中国快速传播,对中国的养猪业构成严重威胁[6]。
非洲猪瘟病毒是一种结构复杂的有囊膜病毒,呈二十面体对称结构[7-10]。含有一个大的双链DNA基因组(170~190 kb),编码多种蛋白质[11-12],目前仅从其中鉴定出约68 种结构蛋白,包括pp220、pp62、p72、p54、p22、p11.5、p12、p17、p10、p14.5、p150、p37、p34、p14 和CD2v 蛋白等[13-14]。但是,大多数非洲猪瘟病毒基因的作用仍然未知,不利于疫病控制。
p22 蛋白由KP177L基因编码,是非洲猪瘟病毒的主要结构蛋白。p22 蛋白为早期蛋白,位于病毒颗粒外部,可被非离子去污剂从病毒颗粒表面上溶解释放出来[15]。用杆状病毒表达的非洲猪瘟病毒p54 和p30 蛋白免疫猪能诱导中和抗体的产生,部分猪能抵御强毒株的攻击[16-17]。但是用杆状病毒表达的p30、p54、p72 和p22 蛋白同时免疫猪,虽然能激发机体产生高滴度具有中和活性的抗体,却不能抵御强毒株的攻击[18]。p22 蛋白作为非洲猪瘟病毒的主要结构蛋白,其具体的生物学功能尚不清楚。特异性高、敏感性强的单克隆抗体是免疫学诊断试剂研发中最关键的生物材料[19-20]。为此,利用杆状病毒表达系统表达非洲猪瘟病毒p22 蛋白,并制备单克隆抗体,以期为p22 蛋白的结构功能研究、亚单位疫苗及诊断试剂开发奠定基础。……
