路 莹，程 立，颜启璋，陈 念，李 晶，郭梦竹，于大海

口腔鳞状细胞癌是上皮来源口腔恶性肿瘤，主要发生淋巴道转移[1]。肿瘤转移的一个关键步骤是循环肿瘤细胞进入二级或较远的器官部位，成为播散肿瘤细胞(disseminated tumor cell，DTC)[2]。DTC能否在远处器官定植、生长成瘤的影响因素很多[3,4]。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是一种分泌性生长因子，其主要作用是促进血管生成，与肿瘤的发展及转移密切相关，其在口腔癌发生、发展中的作用已有较多研究[5,6]。但是，关于口腔癌发展过程中淋巴结和骨髓内的VEGF表达及其与DTC的相互作用尚无研究。在前期研究[7,8]中，本课题组成功使用4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline-1-oxide,4-NQO)饮水法构建了Balb/c小鼠口腔癌颌下淋巴结转移模型，该模型可以获取口腔癌发生、发展及转移过程中不同时期的颌下淋巴结、骨髓进行研究，且小鼠间个体差异小，可连续观测，结果的可靠性及精确度较高。因此，在前期研究基础上，本研究旨在观察口腔癌发展各阶段中骨髓、淋巴结微环境及癌细胞的VEGF表达情况，探讨其在口腔癌淋巴道转移靶向性的相互作用。

1 材料与方法

1.1动物来源与建模 选入40只6周龄雄性健康Balb/c小鼠(购于北京维通利华实验动物技术有限公司)构建小鼠口腔癌淋巴道转移模型，将其随机分为A、B、C、D、E组，每组8只。建模方法[7,8]：用纯水将4-NQO(购自Sigma，美国)配置成1%浓度，4 ℃冰箱保存。A组小鼠将自来水置于塑料瓶中，自由饮用。B～E组小鼠将配制好的4-NQO溶液以自来水稀释成200 mg/L浓度置于避光饮水瓶内，自由饮用，后改喂自来水。……