任春蓉 张战峰 陈春燕 魏小芳 周 洋

高强度聚焦超声（high intensity focused ultrasound，HIFU）作为最具代表性的非侵入性治疗肿瘤的方式之一，应用前景广泛，但其治疗深部肿瘤（如肝癌）时需增加超声功率或延长单次消融时间，且其疗效和生物安全性降低，严重阻碍了其在临床的进一步发展应用［1］。相关研究［2-3］应用超声增效剂改变组织的声环境、增加超声空化作用和能量沉积来增效HIFU 治疗。其中相变超声造影剂通过静脉注射后再行HIFU 辐照，可在肿瘤原位相变产生微泡，增效HIFU 的同时监控HIFU消融过程，取得了较好的效果。然而，HIFU消融不可避免存在残余肿瘤细胞，导致肿瘤复发和转移，同时因HIFU 消融可破坏肿瘤血管致化疗药物难以到达肿瘤［4-5］。本实验拟制备一种叶酸受体靶向的载10-羟基喜树碱相变纳米粒（folic acid receptortargeted 10-hydroxycamptothecin -loaded phase-change nanoparticle contrast agent，FR-HCPT-PNPCA），可以在增效HIFU 消融的同时释放化疗药物，旨在更好地杀灭肿瘤细胞，增强远期疗效，为肿瘤精准治疗提供一种新的手段。

材料与方法

一、实验动物

BALB/c 裸鼠 160 只，3～5 周龄，平均体质量（20.1±2.2）g，购于西南交通大学实验动物中心。所有动物实验均取得西南交通大学医学院伦理委员会同意。

二、仪器与试剂

1.主要试剂和细胞：磷脂酰胆碱（DPPC）、偶联叶酸的磷脂酰乙醇胺［DSPE（PEG）Folate］、普通磷脂酰乙醇胺（DSPE）、甘油磷脂（DPPG）、泊洛沙姆（PF68）及胆固醇（CH）购于美国Avanti 公司，全氟己烷（PFH）购于法国Elf Atochem 公司，末端标记测定法（TUNEL法）检测细胞凋亡和增殖细胞核抗原（PCNA）抗体购于美国 Sigma 公司，10-HCPT、三氯甲烷、甲醛及 TTC 染色试剂购于生工生物工程（上海）有限公司。人肝癌7721 细胞购于中国科学院细胞库，细胞培养液购于美国Gibco公司。……