鸡树突状细胞的间接免疫荧光制片方法比较
2021-01-27何静怡舒鼎铭林楚晓罗成龙
广东农业科学 2020年10期
何静怡,舒鼎铭,林楚晓,李 莹,王 艳,罗成龙
(广东省农业科学院动物科学研究所/畜禽育种国家重点实验室/农业农村部家禽遗传育种重点实验室/广东省动物育种与营养公共实验室/广东省畜禽育种与营养研究重点实验室,广东 广州 510640)
【研究意义】树突状细胞因其成熟细胞具有树突状或伪足样的突起而被命名[1]。作为最重要抗原呈递细胞,树突状细胞是机体内启动特异性免疫应答的关键,其免疫荧光定位和功能研究一直是国内外细胞免疫学研究的热点之一。近几年,免疫荧光技术和激光共聚焦扫描显微镜(laser scanning confocal microscopy, LSCM)分别被广泛应用,学者们找到研究树突状细胞的技术突破。免疫荧光技术是目前综合细胞形态、荧光定量、蛋白定位、免疫功能等研究的最强检测工具,通过观察蛋白上激发特异性标记的荧光,可直观显示其在细胞中的位置,有助于揭示病原在抗原定位和蛋白质功能等方面的特征[2]。激光扫描共聚焦显微镜作为近代生物医学图像分析仪器的重要发展之一,是目前应用最广泛和光学图像分辨率最高的分子细胞生物学分析仪器[3],仅检测反射自焦平面的光线部分,大大提高了图像的分辨率和对比度,使细胞形态和结构更精准。两者联合既进一步提高研究树突状细胞生物学的实验技术和方法,又为细胞生物学研究提供更广阔的前景。
【前人研究进展】细胞爬片是根据细胞对玻璃或塑料的黏附力特点建立的,是观察细胞形态结构最常用的一种试验手段,一般把细胞接种在装有盖玻片的孔板中,待在玻片上贴壁生长后再进行后续的普通染色或免疫试验。……
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