李静，韩永凯，苏静，朱欣茹，宋景贵△

脑卒中后抑郁（post-stroke depression，PSD）是脑卒中常见并发症，表现为情绪低落、兴趣减退、淡漠、反应迟钝等，至少1/3的脑卒中患者会出现心境改变［1］。临床常用的氟西汀、曲唑酮等药物治疗时间长且可能增加复发风险，因此需要寻找更为安全、有效、实用的治疗方法［2］。微小RNA（microRNA，miR）在肿瘤、心肌梗死、脑卒中、癫痫等疾病中参与多条信号通路，是脑卒中诊断、治疗及预后的新型生物标志物［3］。其中miR-134在脑组织中可通过改变树突棘的大小调节突触传递，研究发现在大脑海马组织中miR-134表达升高可降低突触可塑性和神经相关靶基因如环腺苷酸应答元件结合蛋白（CREB）、脑源性神经营养因子（BDNF）的表达，引发癫痫等疾病［4］；而CREB、BDNF均为抗抑郁基因，其表达水平可直接反映抑郁情况［5］。笔者推测抑制miR-134的表达可缓解PSD的进展。因此，本研究通过观察下调miR-134表达对PSD模型大鼠的影响，以期为PSD的基因治疗提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物及细胞SPF级健康雄性SD大鼠32只，体质量220～240 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司［动物生产许可证号：SCXK（京）2017-0011；使用许可证号：SCXK（京）2018-0009］。所有动物均在温度（24.0±0.5）℃、湿度40%～60%、12 h光照/12 h黑暗环境中正常饮食饮水，实验经本院伦理协会审核并通过，伦理审批号：20180060015，整个动物实验期间严格遵循实验动物3R原则。实验细胞HEK-293T购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库。

1.1.2 试剂与仪器miRNA拮抗剂阴性对照（antagomir NC）、miR-134拮抗剂（miR-134 antagomir）、miR-134模拟物（miR-134 mimic）、mimic阴 性对照（mimic NC）、野生型（CREB-WT）和对应突变型（CREB-MUT）重组载体均购自上海吉玛基因股份有限公司；……