金燕，王静，庞淼，张晓雪，刘开扬

宫颈癌是许多发展中国家的女性患癌死亡的常见原因，也是全球女性中最常见的恶性肿瘤［1］。溶瘤病毒（oncology virus，OVs）疗法是一种相对安全有效的治疗方法，可以在恶性肿瘤细胞中选择性复制而不损害正常细胞［2］。新城疫病毒（newcastle disease virus，NDV）则是天然溶瘤病毒的成员之一，属于Avulavirus属，副黏病毒科，可以用于癌症的治疗［3］。细胞骨架是维持真核细胞基本形态的重要结构，可承受细胞外界压力以及保持细胞内部结构的有序性［4］。NDV在肿瘤细胞中识别、感染、释放等过程均会对细胞骨架结构造成损伤［5］。研究发现，细胞骨架重塑可导致微丝及中间丝迅速解聚，使微管结构重组，形成凋亡微管网，凋亡微管网与微丝共同包裹细胞器进而形成凋亡小体［6-7］。NDV是否以细胞微丝骨架为靶点，通过各种途径影响细胞的增殖、迁移与侵袭尚不明确。为此，本实验用NDV F3株感染宫颈癌HeLa细胞，探究NDV抗肿瘤与细胞微丝骨架的关系。

1 材料与方法

1.1 实验材料宫颈癌HeLa细胞及NDV F3株由生命科学中心P2实验室保存。DMEM基础培养基、胰酶及细胞松弛素D（Cytochalasin D）购自美国Gibco公司；胎牛血清购自上海ExCellBio公司；CCK-8试剂盒购自日本同仁公司；Matrigel胶购自美国BD公司；GAPDH抗体购自武汉ABclonal公司；RhoA、Rho激酶（ROCK）2、F-肌动蛋白（F-actin）抗体及辣根过氧化物酶标记的二抗购自北京博奥森公司；Transwell3422购自美国康宁公司；TUNEL凋亡检测试剂盒和Hoechst33258购自上海碧云天生物技术有限公司；考马斯亮蓝-R250购自北京索莱宝科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 HeLa细胞培养用含10%胎牛血清和1%双抗（青霉素和链霉素）的MEM培养基在37℃、体积分数5%CO2、饱和温度条件下常规培养。……