刘相海，李 琦，刘 群

(西南民族大学生命科学与技术学院，四川 610041)

筛选和评价药物的抗肿瘤作用具有体外和体内两种研究方法。体内研究方法主要考察药物对机体肿瘤免疫相关活性细胞和肿瘤免疫相关因子的影响等，体外研究方法主要考察肿瘤细胞对药物的敏感性，如药物抑制肿瘤细胞的生长和药物诱导肿瘤细胞凋亡等[1-3]。体外研究抗肿瘤药物的关键是要选择增殖快、生长稳定、对药物敏感的瘤细胞株系。体外研究主要选用腹水瘤、白血病、各种实体瘤细胞株系，如S180小鼠腹水瘤细胞株、Hepa1-6小鼠肝癌细胞株、L1210小鼠白血病细胞株、B16-F10小鼠黑色素瘤细胞株、SP2/0小鼠骨髓瘤细胞株等[4-7]。目前在天然药物抗肿瘤研究领域，植物多糖和黄酮类化合物对肿瘤细胞的促凋亡作用研究受到国内外广泛关注，并已成为肿瘤治疗的重要手段之一[8-9]。本研究以藏药秦艽花黄酮为研究材料，以S180、Hepa1-6、L1210、B16-F10、SP2/0瘤细胞株为研究对象，CCK-8、AO/EB、Annexin V/PI结合流式细胞术为研究手段，瘤细胞形态、瘤细胞生长抑制率、瘤细胞凋亡率为检测指标，探讨藏药秦艽花黄酮促肿瘤细胞凋亡的作用，为藏药开发利用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 受试药物 藏药白花秦艽(GentianamacrophyllaPall.)花为龙胆科麻花秦艽的干燥花，采集于四川甘孜色达地区(由西南大学园艺园林学院李先源鉴定)，室温通风干燥，避光保存；秦艽花黄酮(藏药秦艽花总黄酮提取工艺条件：乙醇体积分数45%、提取温度60 ℃、提取时间30 min、料液比1∶25，黄酮实际得率22.13 mg/g)，4 ℃冰箱避光保存。……