杨 峰，陈立强 ，许信刚，张为民*，张 琪*

(1.西北农林科技大学动物医学院，陕西杨凌 712100；2.安康学院现代农业与生物科技学院，陕西安康 725000)

猪瘟病毒(Classical swine fever virus，CSFV)属于黄病毒科瘟病毒属，感染猪机体后会导致猪瘟，造成严重的经济损失，世界动物卫生组织(OIE)将猪瘟列为必须报告的动物传染病之一，我国将其列为一类动物疫病[1]。CSFV感染猪不分年龄、性别和品种，四季均可发生，哺乳仔猪和保育仔猪发病率较高，成年猪长期带毒、排毒，形成垂直和水平传播，在猪场反复循环。我国除西藏等地外，其他地区时有CSF发生的报道，给我国养猪业造成了严重的经济损失[2-3]。

自20世纪90年代以来，随着我国对猪瘟疫苗的大面积使用，猪瘟常呈非典型的温和临床经过，以及长期的隐性带毒感染，这给临床诊断造成了较大的困难[4]。因此，临床上常借助反转录PCR(reverse transcription PCR，RT-PCR)方法检测CSFV，然而,常规的RT-PCR方法在灵敏度和重复性以及病毒含量测定等方面存在一些不足。实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR，RT-qPCR)因具有操作简单、灵敏度高、重复性好、耗时短、结果量化等优点，逐渐在实验室对CSFV检测中得到了广泛的应用[5-8]，其中SYBR Green荧光染料法RT-qPCR比探针法费用较低，故得到较普遍的使用，但其存在染料重分布等缺点，而饱和荧光染料Eva Green解决了这一问题。本研究针对NCBI中登录的猪瘟病毒的E2基因设计特异性引物，建立基于Eva Green荧光染料的 RT-qPCR检测方法，以期为CSFV的临床检测提供一种特异、灵敏、快速及量化的方法，能够高效、快速地的检出早期感染和隐性带毒者，为猪瘟防控与净化提供技术支撑。……