刘文莉 国 东 刘加霏 王玉珊 张焕虎 宋文刚

(北华大学医学技术学院，吉林 132013)

SP1属于SP/KLF(Kruppel-like factor)转录因子家族，可通过调节癌基因及抑癌基因、肿瘤细胞凋亡等方式，调控多种肿瘤细胞生长周期相关信号传导途径[1]。研究发现SP1与胃癌的发生发展密切相关，在胃癌患者中，SP1高表达患者的生存时间明显低于弱表达或者低表达的患者，下调SP1的过表达可以抑制胃癌肿瘤的增殖和瘤细胞的形成[2]。

微小RNAs (microRNAs)是真核细胞生物内源性的具有调控功能的非编码RNA，其成熟体通过碱基互补配对的方式识别靶mRNA，根据互补的程度指导沉默复合体降解靶基因或阻碍mRNA的翻译[3]。miR-7自2001首次在果蝇中发现以来，在许多癌症中表达降低，发挥抑癌基因的作用[4]。最近研究发现，miR-7在胃癌组织和胃癌细胞中均显著下调，已逐渐成为胃癌诊断和治疗的靶标[5]。miR-7可通过抑制mTOR (mechanistic target of rapamycin)的表达，增强胃癌细胞对顺铂的敏感性[6]；通过抑制上皮生长因子受体和胰岛素样生长因子1受体的表达，抑制胃癌细胞的侵袭和转移能力[7]。基于上述理论，miR-7与SP1可能存在某种联系，但目前没有关于miR-7作用于SP1对胃癌参与调控的相关研究报道。

本研究拟通过构建双荧光素酶报告质粒及突变质粒，以阐述miR-7调控胃癌细胞SP1表达的分子机制，为研究miRNAs在胃癌中的作用提供新的思路。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1主要试剂 细胞总RNA抽提取试剂盒、质粒抽提试剂盒、通用型DNA纯化回收试剂盒购于TIANGEN公司；50 bp DNA ladder、D2000 DNA Marker、1 kb plus DNA ladder、Pro-Light HRP化学发光检测试剂购于天根生化科技(北京)有限公司；……