夏儒锐 梁培育 王声兴 欧善际 彭晓晖

(海南医学院第一附属医院泌尿外科，海口 570102)

膀胱癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤，以膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma，BUC)最为常见，其易复发和转移性及术后并发症导致患者生存质量降低，患者5年生存率低于15%[1]。研究其发展的分子机制对疾病的靶向治疗极其重要。研究表明，lncRNA和miRNA在可作为预测BUC患者生存和预后的独立标志物[2-3]。有报道，lncRNA HOXA11-AS(homeobox A11-antisense RNA)在肝癌组织、骨肉瘤组织和细胞及口腔鳞状细胞癌组织中高表达，其过表达可促进口腔鳞状细胞癌细胞的增殖，抑制其表达可抑制肝癌和骨肉瘤细胞的迁移和侵袭能力[4-6]。本研究通过生物信息学预测，发现miR-515-5p可能是lncRNA HOXA11-AS的靶基因。MiR-515-5p在前列腺癌、非小细胞肺癌和胃癌细胞中表达下调，过表达miR-515-5p可抑制癌细胞的增殖或转移[7-9]。但lncRNA HOXA11-AS和miR-515-5p在BUC中的表达、对癌细胞的影响及两者的关系目前还尚未可知。本研究探寻HOXA11-AS和miR-515-5p在BUC细胞增殖、迁移、侵袭中的作用机制，以期为BUC的诊断治疗提供新的分子生物学靶点。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1标本 选取2016年6月至2017年12月于本院病理检查确诊为BUC的患者手术切除的BUC组织及癌旁组织(距离BUC组织边缘>1.5 cm)各20例，男16例，女4例，年龄26～80岁，平均年龄(49.5±16.6)岁，按照2006年WHO标准分类，浸润性14例，非浸润型6例。所有患者术前未接受放疗和化疗。本研究通过医院医学伦理委员会批准，并与所有患者签订知情同意书。

1.1.2试剂及仪器 人BUC细胞株J82购自ATCC；胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)和MEM培养基购自美国Gibco公司，Total RNA提取试剂盒、RT-PCR试剂盒、反转录试剂盒(RT-PCR)、Lipofectamine 2000转染试剂购自美国Invitrogen公司；四……