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槲皮素对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化抑制作用和肝保护作用①

2021-01-26陈文龙戴富臻邵正勇徐明清

中国免疫学杂志 2021年1期
关键词:剂量模型

陈文龙 戴富臻 邵正勇 蒋 利 徐明清

(成都市龙泉驿区第一人民医院普外科,成都 610100)

肝纤维化是一种慢性肝损伤疾病,其特点是细胞外基质的过度积累和正常肝脏结构的扭曲[1]。由于持续的慢性肝损伤,肝纤维化可发展为肝硬化、肝细胞癌,严重时甚至导致死亡[2]。因此肝纤维化在不同的慢性肝病的发生发展中都起着至关重要的作用。因此,阐明肝纤维化的分子机制和寻找治疗肝纤维化有效的药物十分重要。据报道,槲皮素具有广泛的药理特性,具有抑制肝纤维化的作用[3]。然而,槲皮素的抗纤维化机制迄今尚未完全阐释清楚。本文旨在探究槲皮素对大鼠肝纤维化和炎症的作用和机制。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1实验动物 6~8周龄健康Wistar大鼠,雄性,体重150~200 g,购自江苏省实验动物中心,大鼠饲养标准环境中。

1.1.2主要试剂 槲皮素购自美国Selleck公司;CCl4购自江苏强盛化工有限责任公司;TRIzol试剂(15596026)购自美国Invitrogen公司;PrimeScript RT试剂盒(#6210A)和SYBR green(#RR420Q)购自日本TaKaRa公司;IL-6、TNF-α和IL-1β ELISA试剂盒购自美国R&D公司;HE染色试剂盒购自北京索莱宝公司;丙氨酸转氨酶(ALT)生化分析试剂盒(C009-1)、天冬氨酸转氨酶(AST)生化分析试剂盒(C010-2)和羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)试剂盒(A030-2)购自南京建成生物技术研究所;anti-α-SMA(ab5694)、anti-collagen-I(ab34710)和anti-β-catenin(ab32572)抗体购自英国Abcam公司。

1.2方法

1.2.1动物分组及模型建立 大鼠肝纤维化模型根据文献[4]建立。Wistar大鼠分为5组(n=10):对照组:灌胃橄榄油;模型组:大鼠给予CCl4(CCl4:橄榄油=1∶1,2 ml/kg)灌胃,每周3次,共8周,诱导肝纤维化;低中高剂量治疗组(EXP-L、EXP-M、EXP-H):3组大鼠分别灌胃榭皮素 15、30和50 mg/kg,每天1次,连续4周;再灌胃CCl4(50%CCl4/橄榄油,2 ml/kg),每周3次,连续4周。……

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