赵彦芬，赵峰，刘鹏森，毛轲

河南省中医院/河南中医药大学第二附属医院麻醉科，郑州 450002

吗啡是临床上解除剧烈疼痛的主要药物，也是全球使用量最大的强效镇痛剂。然而，长期使用可能导致生理性吗啡耐受，主要表现为患者在注射吗啡后对疼痛的耐受减退甚至消失[1-2]。对于吗啡耐受的患者，若要达到同等的镇痛效果，需要更大剂量用药，但会引起一系列不良反应。越来越多的研究证实，小胶质细胞活化和炎性因子的产生在吗啡耐受形成过程中发挥重要作用[3-4]。因此，寻找能够安全有效地抑制小胶质细胞活化和炎性因子产生的潜在靶分子对于治疗吗啡耐受具有重要意义。热休克蛋白(heat shock protein，HSP)是一类高度保守且广泛表达的应激蛋白，在应激状态下表达显著增加，可保护机体免于受损[5-6]。已有研究证实，吗啡可以上调HSP60的表达[7]，但HSP60在吗啡耐受中介导小胶质细胞活化和炎症反应的作用尚不明确。本研究通过鞘内注射siRNA-HSP60和吗啡，观察siRNA-HSP60对大鼠疼痛耐受、炎性因子表达、TLR4-p38 MAPK信号通路的影响，旨在探索HSP60在吗啡耐受中的作用及可能机制。

1 材料与方法

1.1 主要试剂及仪器 盐酸吗啡购自沈阳第一制药厂(批号：170406)；脂多糖(LPS)购自美国Sigma公司；Prime Script试剂盒购自日本TaKaRa公司；OX-42抗体购自美国Abcam公司；FITC标记的抗羊荧光二抗购自美国Millipore公司；HSP60、Toll样受体4(TLR4)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抗体购自美国Cell Signaling Technology公司。恒温水浴锅购自北京市长风仪器仪表公司；荧光显微镜购自日本Olympus公司；……