郭智慧

（开滦总医院内分泌二科，河北 唐山 063001）

大豆异黄酮被称为植物雌激素，属于一种黄酮类化合物。近年研究发现大豆异黄酮通过调节体内雌激素水平对防治更年期妇女症状，骨质疏松，抑癌（胃癌、乳腺癌、肺癌和直肠癌等），心血管疾病，老年痴呆等多种病症有改善作用[1-2]，而对其增免作用研究较少。本实验对其增免作用做一研究，为后期上市推广提供依据。

1 材料与方法

1.1 受试物：

大豆异黄酮（纯度为40%），生产企业为东明荟仁生物制品有限公司。

1.2 实验动物：

清洁级昆明种小鼠，体重18～22g，由斯贝福（北京）实验动物科技有限公司。实验前适应性饲养一周。

1.3 分组及给药：

将小鼠按体重随机分为三批12个实验组，每组10只。分别为对照组、高（30mg/kg·BW）、中（20mg/kg·BW）、低剂量组（10mg/kg·BW）。称取大豆异黄酮，与蒸馏水混合均匀配成3mg/ml、2mg/ml、1mg/ml浓度的受试物溶液，实验组给予相应受试物溶液，对照组灌胃等体积蒸馏水。灌胃体积均为10ml/kg·BW， 1次/d，连续30d。

1.4 方法

1.4.1 脏器/体重比值：给药结束后，小鼠称重，处死，取脾脏和胸腺，处理干净脏器表面血污，并滤纸吸干，称脾脏重和胸腺重量，计算脏器/体重比值。

1.4.2 脾淋巴细胞转化试验：小鼠脱颈椎处死后无菌取脾，研磨后制成脾细胞混悬液。用Hanks液将细胞悬液洗涤后离心，置于完全培养液中，将细胞浓度调整为3×106个/ml。每只小鼠脾细胞混悬液分两孔加入到24孔培养板中，一孔做对照，一孔加ConA液，每孔1mL。置5%CO2，在37 ℃培养箱72 h。培养结束前4 h，每孔都吸去上清液0.7 ml，同时加入0.7 ml不含小牛血清的1640培养液，并加5m/mL MTT， 50μl/孔，继续培养4 h。结束后，每1孔加1 ml酸性异丙醇，吹打均匀，至紫色结晶溶解完全。……