王艳双，姜海瀛，刘美琳，高丽君，李明成, 3，孙丽媛，张丽华，艾金霞, 3*

中药材鹿心分子鉴定方法及检测试剂的研究

王艳双1, 3，姜海瀛2，刘美琳1，高丽君2，李明成2, 3，孙丽媛2，张丽华4，艾金霞2, 3*

1. 北华大学医学院，吉林 吉林 132013 2. 北华大学医学技术学院，吉林 吉林 132013 3. 北华大学 吉林省中药DNA指纹检测技术科技创新中心，吉林 吉林 132013 4. 吉林雷宁食品药品检测技术服务有限公司，吉林 吉林 132013

建立中药材鹿心DNA指纹鉴定方法，研发鹿心DNA检测试剂盒。以梅花鹿和马鹿mtDNA基因作为靶基因，设计小片段特异性引物，研制鹿心DNA提取及PCR检测试剂；应用分子克隆及测序技术，克隆鹿心对照药材；并对试剂的特异性、重现性、稳定性及灵敏度进行考察；对市售鹿心样品进行真伪鉴定。自主研发的试剂提取鹿心的DNA浓度纯度均达到PCR的要求；在退火温度为63 ℃时引物的特异性最强；克隆测序后的鹿心DNA序列与鹿心mtDNA特异指纹区段序列一致；自主研发的试剂重现性、稳定性良好，灵敏度达到0.5%；对市售30个鹿心样品进行检测，伪品率为40%。建立的鹿心DNA指纹鉴定方法特异、准确、可靠，研制的鹿心DNA检测试剂盒操作简便、结果稳定。

鹿心；DNA指纹鉴定；DNA检测试剂盒；分子克隆；测序技术

鹿心为为哺乳纲偶蹄目鹿科鹿属动物梅花鹿Temminck或马鹿Linnacus的心脏[1]。鹿心为吉林省的习用药材，收载在《吉药管注字》［2000］第132号。传统中医认为鹿心具有养气补血、安神的功效，以鹿心为主要原料的“心脑康胶囊”（国药准字号Z20063078），用于冠心病、心绞痛及脑动脉硬化症疗效显著[2-3]。……