吴贤建,路 远，石 凤，王安民，张 亚，浦 涧

(1.右江民族医学院研究生学院，广西 百色 533000；2.右江民族医学院附属医院肝胆外科，广西 百色 533000)

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是最常见的原发性肝癌类型，也是全球第六大最常见的癌症[1]。肝癌被认为是导致癌症死亡的第二大原因，全世界每年有700 000多例肝癌死亡[2]。早期肝癌患者通常没有任何症状，大多数肝癌患者在晚期被诊断出来，因此预后较差，5年总生存率低于10%[3]。HCC肿瘤发生和发展的分子机制尚未完全了解，揭示这些问题有助于开发HCC的新诊断与治疗方法。

长的非编码RNA(long noncoding RNA，lncRNA)是长度超过200个核苷酸的非蛋白质编码RNA[4]。越来越多的证据表明，lncRNA参与了许多基因调控的基本过程，包括对miRNA功能的调节[5-7]，直接转录调控[8]，基因沉默和染色质结构修饰[9]。lncRNA在许多肿瘤发生和发展中起着至关重要的作用[10-12]。CTD-2510F5.4 是最近被发现在肺癌[13]与胃癌[14]中显著高表达的lncRNA，但CTD-2510F5.4在肝癌中的研究未见相关报道。本研究通过TCGA数据库分析、沉默试验，检测CTD-2510F5.4沉默对体外Huh-7肝癌细胞增殖、侵袭、凋亡及RACGAP1的表达的影响，以探讨CTD-2510F5.4在肝癌发生发展中的作用及其可能机制。

1 材料与方法

1.1 实验材料与主要仪器

Huh-7人肝癌细胞购自上海生科院，RNA提取试剂盒购自天根生化科技(北京)有限公司，CCK8试剂盒购自北京全式金生物技术有限公司(FC101-03)，DMEM培养基购自Hyclone公司(SH30022.01), lipo 3000购自Thermo Fisher公司(货号：L3000015)，胎牛血清购自Gibco(42F7180K)，Annexin V-PE/7-AAD双染细胞凋亡检测试剂盒购自Biolegend公司(640934)，迁移小室购自Coring公司(3422)，基质胶购自Coring公司(货号：354248)， CTD-2510F5.4 siRNA与阴性对照载体购自湖州河马生物科技有限公司，序列：5'-GCAATATAGCAAGACACTGACTCTA-3'， RACGAP1抗体(ab2270)与actin抗体(ab8226)购自abcam公司。……