胡仕婕， 赵 洋， 冯艺川， 李子羊， 全雪丽， 吴松权*

(1.延边大学农学院，吉林 延吉 133002；2.百泰生物药业有限公司，北京 100176)

黄芪(Radix Astragali)具有补气固表、利尿消肿、托毒生肌之功效，在传统中药与临床医学中已被普遍应用，素有“十药八芪”之称[1]。现代医学研究表明，黄芪能够预防感冒、肺结核盗汗、慢性肝炎、增加肾血流量、减轻肾损伤、增强机体耐缺氧及应激能力等症[2-4]。其中，膜荚黄芪(Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bunge)及其变种蒙古黄芪(Astragalusmembranaceus(Fisch.) Bunge var.mongholicus(Bunge)Hsiao)被确定为中药黄芪，其他黄芪作为黄芪代用品或地方性用品[5-7]。芒柄花素(Formononetin)属于甲基化的异黄酮类化合物，是黄芪最具活性的主要成分之一，具有抗肿瘤、抗氧化、抗心率不齐、抗菌、降血脂、改善动脉粥样硬化病变和雌性激素样作用等多种作用[8]。

膜荚黄芪是长白山区道地药材之一，由于市场上对于膜荚黄芪需求的急剧增加，使得长白山区野生膜荚黄芪供不应求。虽然大规模的人工栽培黄芪使其得到了较好地补充，但栽培黄芪无论外观品质还是成分含量均远低于野生黄芪。异黄酮O-甲基转移酶基因(Isoflavone O-methyltransferase，IOMT)属于FOMT基因家族的一员，在毛蕊异黄酮葡萄糖苷生物合成中将甲基基团转移到大豆苷元(Daidzein)生成芒柄花素，是其生物合成的关键基因。因此，该研究以长白山膜荚黄芪为试材，克隆AmIOMT基因的全长序列，探究其在膜荚黄芪不同组织中的表达特性，为分子水平上了解芒柄花素的生物合成机制和调控规律奠定一定的理论基础。

1 材料与方法

1.1 材料

黄芪药材源自长白山区野生膜荚黄芪，经延边大学农学院植物学教研室石铁源教授鉴定为膜荚黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.) Bunge。……