冯晓玲 高鸿亮

炎症性肠病（inf lammatory bowel disease，IBD）分为溃疡性结肠炎与克罗恩病，是特发性肠道炎症疾病，具有发病早、病程缓和易复发特点，患者发病后需要接受长时间治疗，严重影响患者正常生活[1]。目前仅了解IBD 发病主要由遗传、肠道细菌、环境以及肠道免疫系统失调等众多因素一同导致[2]。炎症反应过程与机体免疫系统功能关系密切，探究肠道炎症发生时机体免疫功能变化对于了解肠道炎症疾病合理免疫治疗方案制定具有重要意义。调节性T细胞（Treg）可通过细胞之间相互作用与因子释放达到减少辅助T细胞增殖、抑制促炎因子分泌、减少免疫损伤和巩固免疫耐受的目的[3]。ω-3 多不饱和脂肪酸（ω-3 polyunsaturated fatty acids，ω-3 PUFAs）作为人体正常运转必需脂肪酸之一，其主要由二十碳五烯酸与二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid，DHA）组成，不仅可以为机体提供能量，还可以作为药物治疗自身免疫性疾病，甚至能够抑制T细胞及淋巴细胞增殖[4]。本研究以IBD 小鼠为模型，进一步明确ω-3 PUFAs对IBDTreg细胞的影响。

材料和方法

一、材料

1.动物和试剂：小鼠来自新疆医科大学第五附属医院动物研究中心，三硝基苯磺酸、维甲酸（美国Sigma公司），ω-3 PUFAs、DHA、饱和脂肪酸硬脂酸（美国Peprotech公司），RPMI- 1640 培养基、PBS 磷酸盐缓冲液（上海士峰生物科技有效公司），胎牛血清（美国Thermo Scientif ic公司），annexinV- FITC 凋亡检测试剂盒（上海碧云天公司），FITC- anti-CD4、

PE- ant- CTLA- 4、APC-anti-Foxp3、PE-anti- CD39、PE- anti- CD25、anti-CD3、anti-CD28 单克隆抗体、固定/通透液、高尔基体阻断剂BD Golgistop 蛋白转运抑制剂（丹麦eBioscience公司），鼠CD4+CD25+Treg 分离试剂盒（上海强智生物科技有限公司），TGF-β、IL-2（南京欧凯生物公司），CFSE 及anti-CD3/CD28 beats（美国Gibcolifetechnologies 公司），白介素-10（IL-10）、Foxp3 以及干扰素-γ（IFN-γ）酶联免疫吸附试剂盒（美国Invitrogen公司）。……