冠心病是多基因遗传因素和环境因素共同作用的疾病[1]，其中代谢异常与冠心病不同进展阶段密切相关[2]。代谢组学系统反映体内小分子代谢物变化，有助于发现与疾病发生及诊治相关的生物标志物[3]。本研究利用超高效液相色谱—飞行时间质谱联用（UHPLC-QTOF/MS）技术分析冠心病不同进展阶段患者血浆代谢图谱变化，探索与冠心病发生和发展相关的代谢物。

1 资料与方法

1.1 研究对象

筛选2013 年5 月至2015 年3 月于中国医学科学院阜外医院接受冠状动脉造影患者中选择至少一支主支冠状动脉狭窄50%～70%的临界病变患者19例（临界组），根据性别年龄1:1 匹配的冠状动脉正常者20 例（正常组）和罪犯血管狭窄80%～100%的急性心肌梗死患者18 例（心肌梗死组），共57 例，其中男性31 例，女性26 例。所有患者均排除其他器质性心脏病、免疫及代谢性疾病。研究经中国医学科学院阜外医院伦理委员会批准（伦理号：2012-431）。

1.2 样本准备

患者冠状动脉造影前取静脉血5 ml，4℃ 2 300 rpm 离心10 min 分离血浆，12 000 rpm 离心15 min，取400 μl 上清液-80℃保存。从所有待测样本中各取10 μl 混合为质量控制标本（quality control，QC）。

1.3 UHPLC-QTOF/MS 检测

利用超高效液相色谱系统（型号：1290 UHPLC，品牌：Agilent）和高分辨质谱系统 （型号：Triple TOF 6600，品牌：AB Sciex ）进行检测。

利用阳离子相和阴离子相两种电离模式联合，对血清进行一级、二级离子检测。色谱条件：色谱柱Waters ACQUITY UHPLC HSS T3 （2.1×100 mm，1.7 μm）；流动相A 阳离子相为0.1%甲酸溶解于水，阴离子相为0.5 mM 氟化铵溶解于水；流动相B 阳离子相为0.1%甲酸溶解于乙腈溶液，阴离子相为乙腈溶液。序列中每隔8个检测样插入1个空白样（75%乙腈溶液）和1 个QC 样，进样量4 μl。……