杨 馨,刘 娜,张佩青,王海艳,陈 明

(黑龙江省中医药科学院·黑龙江 哈尔滨 150036)

水蛭是有破血、逐瘀、消癥功效的一味虫类药，其主要成分为蛋白质及多肽分子，按药理分为直接作用于凝血系统的活性成分、其他蛋白酶抑制剂组分，以及一些小分子化合物和微量元素[1]。水蛭制剂在肾脏疾病的治疗中已经得到广泛应用[2]，在前期的实验研究中，本课题组发现水蛭能够保护FSGS大鼠肾脏，减轻肾脏病理形态学改变，减少细胞外基质(ECM)的重要组成部分Ⅳ型胶原蛋白和纤维粘连蛋白的表达，使局灶节段性肾小球硬化的进程得到延缓[3]。基质金属蛋白酶类是调控ECM降解的重要酶类，参与ECM的重塑并稳定组织的发育和内环境，其中MMP-9主要降解Ⅳ型胶原蛋白，TIMP-1是MMP-9的特异性抑制因子，MMP-9与TIMP-1的动态平衡在ECM的生理平衡中起关键作用[4-5]。本实验观察水蛭对FSGS大鼠肾脏MMP-9、TIMP-1蛋白表达的影响，进一步探讨其延缓局灶节段性肾小球硬化进程的机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物 成年雄性SPF级Wistar大鼠52只，180～220 g，实验动物许可证号：SCXK-(吉)2011-0003；由长春市亿斯实验动物技术有限责任公司提供。

1.2 主要药品与试剂 水蛭江阴颗粒(0.5 g/袋：相当于饮片3 g)：江阴天江药业有限公司。阿霉素：辉瑞制药(无锡)有限公司；兔抗大鼠MMP-9多克隆抗体、兔抗大鼠TIMP-1多克隆抗体：北京博奥森生物技术有限公司；PV-6001兔抗鼠二抗：北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.3 主要仪器 2135型切片机：德国莱卡；CK-2型光学显微镜：CH型摄影显微镜：日本OLYMPUS；美国moticam3000显微摄影成像系统。

1.4 模型制备、分组 实验大鼠购入后适应性喂养1周后，随机分为正常组12只，假手术组12只，造模组28只。……