曾 超，陈 静，刘文兵，李 辉，王 静，马睿杰

(浙江中医药大学附属第三医院·浙江 杭州 310012)

目前已经明确，溶栓治疗性血管再通及自然再通(血管侧枝建立)的再灌注后，产生严重的缺血性再灌注(ischemia/reperfusion，I/R)损伤[1-2]。损伤机制主要为活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)和自由基的大量产生，使得超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)等酶的清除能力有限[3-4]。针灸治疗在脑血管疾病治疗方面应用广泛，其机制研究目前均致力于针刺干预对脑血管疾病氧化反应的某些环节，清除已经形成的氧化物质，对氧化反应上游靶点的研究及调节通路研究甚少。本研究从ROS产生的主要来源，氧化应激的上游靶点即还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(nicotinamide adenine dinucleotidephosphate 0xidase，NOX)，如何参与脑损伤的发生以及其对神经元的作用机制角度进行研究，其中NOX催化亚单位NOX2/gp91phox与缺血性脑卒中等神经系统疾病密切相关[5-6]；并采用敲除此基因片段的小鼠作为阳性对照组，从更相似更平行的机理角度去揭示电针的抗氧化机制，运用生物科技手段开创针刺治疗脑血管疾病的一个崭新研究领域。

1 材料与方法

1.1 动物、模型制备及分组 健康雄性7～9周龄C57/BL6野生型小鼠120只，体质量(25.30±2.50)g，由浙江中医药大学动物实验中心提供，许可证号：SCXK(沪)2013-0016。gp91phox基因敲除组(以下文简称基因组)小鼠30只，体质量(23.40±2.02)g，购于南京大学模式动物研究。120 只C57/BL6小鼠和30 只基因敲除小鼠均按照经典的Zea-Longa改良线栓法[7]制备小鼠I/R模型。动物成模后按体质量编号后随机分为：3、24、48 h 3个大组(基因组用特殊的记号笔标识)，每个大组又分为模型组、电针组、药物组、基因组4个小组，每组10只，另按各时间点设假手术组，每组10 只。……