林 楠

(福建省水产技术推广总站，福建 福州 350002)

近年来随着对虾养殖业的不断发展，各类新型对虾传染性疾病频发，如急性肝胰腺坏死病(Acute hepatopancreas necrosis disease，AHPND)[1]、肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei，EHP)病[2]、虹彩病毒(Shrimp hemocyte iridescent virus，SHIV)病[3]等，已经严重威胁我国对虾产业的可持续发展。急性肝胰腺坏死病是近年全球范围内对对虾养殖影响较为严重的急性传染病之一。患病对虾主要临床症状表现为肝胰腺萎缩、颜色变浅，空肠空胃，甲壳变软，失去活力等，常为急性死亡，死亡率高达100%。由于该病主要感染放养后7～30 d的虾苗，又被称为早期死亡综合征(Early mortality syndrome，EMS)，可感染包括凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)、斑节对虾(Penaeusmonodon)和中国明对虾(Penaeusjaponicus)等对虾种类[4]。该传染病是由携带含毒力基因pirAVP和pirBVP质粒pVA1的弧菌引起的，该质粒能够表达毒力蛋白PirAVP和PirBVP。目前已报道可引起AHPND的病原菌有副溶血弧菌(Vibrioparahemolyticus)、欧文氏弧菌(Vibrioowensii)、坎贝氏弧菌(Vibriocampestris)等[5-7]。2019年7月，福州市某养殖场发生养殖凡纳滨对虾暴发死亡，死亡率约70%，发病对虾临床症状符合典型AHPND症状。本研究对疑似患AHPND的对虾进行了病原分离鉴定、致病性和耐药性分析，以期掌握该病原的生物学基本特征，为AHPND的流行病学研究和防控技术开发提供基础资料。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验用虾

患病凡纳滨对虾样品于2019年7月采自福建省福州市某养殖场，个体全长为6.2～7.3 cm。回归感染实验用健康凡纳滨对虾来源于福州另一家养殖场，全长为4.1～5.5 cm。实验期间养殖水温为(28±1)℃，按照正常对虾养殖方式管理。实验前实验用虾暂养1周。

1.1.2 主要实验仪器

PCR仪来自BIO-RAD公司，型号：T100TMThermal Cycler；凝胶成像仪来自Bio-Rad，型号：GelDoc XR+；……