黄世群,文 婷,秦 琳,赵 珊, 仲伶俐,李 曦,白 胜

(1.四川省农业科学院分析测试中心，四川 成都 610066；2.四川省农业科学院服务中心,四川 成都 610066)

粗蛋白质是动物饲料中重要的营养成分，也是衡量饲料营养价值极其重要的指标之一。饲料范围极其广泛，常常会有颗粒饲料、饲料原料、饲料添加剂、预混料、青饲料、青贮饲料等等，作为检测单位颗粒饲料、饲料添加剂、预混料等是最常见的饲料品种，制样也方便、快捷，粗蛋白含量较高，检测结果比较准确。由于我国蛋白质饲料资源缺乏，为充分利用自然资源，各种自然界的杂草都可能被探索，以期作为动物青饲料得以利用。因此作为检测中心收到的样品是五花八门，有稻草、滕蔓植物、杂草、红薯叶等等，有的委托检测时写有品种名，有的直接就是牧草代替名称，而且送检青饲料90%以上都是原样，长短不齐，粗细不均，老嫩不一等，如玉米植株直接就是玉米茎带叶带玉米棒整株送检。因此，这类样品既要保证样品具有代表性，还要充分满足检测要求，选择最合适的检测方法和检测仪器才能准确测试青饲料粗蛋白质含量。

目前，对于饲料粗蛋白质测定有3个标准方法，GB/T6432-2018饲料中粗蛋白质的测定 凯氏定氮法，此法适用于配合饲料、浓缩原料和单一饲料中粗蛋白质的测定[1]；SN/T2115-2008进出口食品和饲料中总氮及粗蛋白的检测方法，此法适用于进出口食品和饲料总氮测定并计算粗蛋白含量[2]；GB/T24318-2009杜马斯燃烧法测定饲料原料中总氮含量及粗蛋白质的计算，此法只适用于单一饲料原料中总氮含量和粗蛋白质含量计算[3]。随着人们环保意识的增强，燃烧法在我国越来越被认可，不仅在化学制药、能源、石油化工、测定环境等方面得到利用，而且在农业土壤、肥料、饲料、农产品及食品方面均已广泛应用，而燃烧法仪器也在不断更新换代，目前，德国ELementar公司生产的最新一代产品(rapid MAX N exceed)杜马斯燃烧法氮/蛋白质分析仪，它是从“微量分析”覆盖到“痕量”“微量”“常量分析”，检测氮含量范围在0.04%～100%间，可以广泛运用于食品、饲料、肥料和土壤等氮或粗蛋白含量的检测。

为探索 (rapid MAX N exceed) 杜马斯燃烧法氮/蛋白质分析仪测定青饲料中粗蛋白质含量可行性，使用该杜马斯燃烧法氮/蛋白质分析仪与自动凯氏定氮仪分别以16个青饲料为材料进行总氮测定，并利用其检测所得总氮含量计算出粗蛋白含量并进行对比分析，进一步了解(rapid MAX N exceed) 杜马斯燃烧法氮/蛋白质分析仪性能，以及对青饲料样品检测的适应性和准确性，以便更好更快地提供服务。

1 材料与方法

1.1 样品的选择与制备

1.1.1 样品的选择 本试验选用的青饲料为4个金牧粮草、4个牧草、1个皇竹草、1个象草、1个聚才草、1个黄金草和4个甘薯叶片共16个样品为供试材料，均由四川省农业科学院分析测试中心提供，为客户送检样。

1.1.2 样品的制备 4个甘薯叶片分别切碎后用匀浆机制备成匀浆样品后进行测试，其他12个草类样品样品分别切成小段，用匀浆机打碎后用磁盘装好摊平后放入恒温干燥箱内，按国家标准GB/T6435-2014 饲料中水分的测定方法进行烘干处理并恒重计算出水分[4]，然后将烘干样品进行制备成粉碎状进行测试。

1.2 主要测试仪器

AUY220 电子天平(精度0.1mg)；消化炉(FOSS公司)；自动凯氏定氮仪(FOSS8200 瑞典);新型杜马斯燃烧法定氮仪(rapid MAX N EXCEED 德国ELementar公司)；恒温干燥箱。

1.3 检测方法

自动凯氏定氮法：GB/T6432-2018饲料中粗蛋白质的测定 凯氏定氮法，以总氮×6.25为粗蛋白含量。

新型杜马斯燃烧法氮/蛋白质分析仪法：按GB/T24318-2009杜马斯燃烧法测定饲料原料中总氮含量及粗蛋白质的计算标准进行检测。按总氮×6.25粗蛋白换算系数仪器自动得出粗蛋白含量。

饲料水分测定方法：GB/T6435-2014 饲料中水分的测定中直接干燥法进行测定。

1.4 统计分析

采用DPS统计软件对数据进行方差分析和多重比较，采用EXCEL软件进行线性回归分析，P<0.05认为统计学市委常委显著性差异[5]。

2 结果与分析

由于饲料没有标准物质，因此新型杜马斯燃烧法氮/蛋白质分析仪法和自动凯氏定氮法均选用标准物质含氮量高、中、低的硫酸铵、全麦粉和土壤作参考进行精密度和质量控制测试，两种仪器重复测试标准物质含氮量均接近真实值，表明仪器运行完全正常，测试供试样品结果如下。

表1 2种方法测定出的16个供试样品原样粗蛋白质含量结果与分析(n=3) (单位：%)

从表1得知，16个样品采用自动凯氏定氮仪和新型杜马斯燃烧法氮/蛋白质分析仪测定粗蛋白质含量结果其RSD<5%，同一样品两种仪器的测定结果没显著差异(P>0.05)，同一样品测定值新型杜马斯燃烧法氮/蛋白质分析仪测定值多数高于自动凯氏定氮仪的测定值(R/K值>1.0以上的11个)。

3 结论

新型杜马斯燃烧法氮/蛋白质分析仪是利用燃烧过程中形成的氮气气流通过热导检测器(TCD)进行检测，利用所得峰面积得出氮含量，由于应用软件设计合理，只要输入相应的粗蛋白质换算系数，一旦样品检测完毕则仪器自动得出所测样品的粗蛋白含量，操作简单、测量快速、结果准确等，不需消煮，不需大量化学试剂特别不需强酸强碱，省力省时环保[6]，经样品测试精密度高，准确性好，因此新型杜马斯燃烧法氮/蛋白质分析仪可以用于青饲料粗蛋白含量测定。