司茂飞，郑国栋，吴秀杰，张 健＊

(1山东第一医科大学，山东 泰安 271000；2临沂市人民医院)

创伤性脑损伤(Traumatic brain injury，TBI)临床常见，致残率及死亡率高。有研究表明，细胞周期调控参与了脑损伤后的修复过程。细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p27通过直接抑制cyclinE/CDK2复合物负调控细胞周期进程，阻断细胞周期从G1期到S期的进程[1]。叉头盒O (Forkhead box O，FOXO)蛋白是叉头转录因子家族的一个亚家族，调节细胞存活和细胞周期进展。FoxO3a是FOXO的一个亚型，有文献报道FoxO3a在乳腺癌、膀胱癌、肝癌、结直肠癌、胶质瘤等肿瘤中具有抑制作用[2-3]，其在癌细胞中的功能缺失会导致调控细胞周期进展的基因过表达[4]。本文通过FoxO3a/p27在成年大鼠脑损伤后的变化和功能，探索中枢神经系统损伤和修复的机制。

1 材料和方法

1.1TBI模型制作[5]取成年雄性S-D大鼠45只，体质量200～225 g，按12 h的明暗循环饲养在无菌环境，可以自由获得水和食物。10%水合氯醛溶液深度麻醉大鼠，无菌条件下将一把微刀插入距头颅正中矢状线右侧边3 mm的皮质，做一个长、深、宽分别为5 mm×3 mm×1 mm的手术切口，致其脑损伤，然后将切口分层用4-0丝缝线和钉书针缝合，然后将模型鼠置于加热垫上促其恢复，共制作成功33例模型，分别于伤后12 h、1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、28 d处死。另取3只正常大鼠作为对照组，于3 d时处死。所有实验均按照美国国立卫生研究院实验动物护理和使用指南进行，该实验方案均经临沂市人民医院医学伦理委员会批准。

1.2免疫印迹分析 免疫印迹分析样本的获取：取模型鼠伤口周围的脑组织以及对侧等份脑组织(70～90 mg)，对照组大鼠取单侧同等脑组织，并立即在-80℃冷冻备用。……