董惠敏，许如玲，何丹丹，范君婷，鞠建明*

董惠敏1, 2，许如玲2，何丹丹1, 2，范君婷3*，鞠建明1, 2*

1. 南京中医药大学附属中西医结合医院，江苏 南京 210028 2. 江苏省中医药研究院，江苏 南京 210028 3. 南京医科大学药学院，江苏 南京 211166

1 仪器与试药

1.1 仪器

Waters Alliance高效液相色谱系统：配有2695溶剂管理系统、2996二极管阵列检测器和Empower色谱工作站；KQ-500DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；Milli-Q型纯水器（美国Millipore公司）；AT2011/10万电子天平（瑞士Mettler公司）。

1.2 试药

表1 样品信息

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Agilent C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 µm）；流动相：甲醇（A）-0.4%甲酸水溶液（B）；梯度洗脱，0～20 min，20%～40% A；20～32 min，40%～44% A；32～36 min，44%～50% A；36～44 min，50%～60% A；44～62 min，60%～70% A；62～72 min，70%～90% A；72～73 min，90%～20% A；73～83 min，20% A；体积流量1.0 mL/min，柱温35 ℃，检测波长254 nm，进样量10 µL。

2.2 溶液的制备

2.2.2 供试品溶液制备 取印度獐牙菜粉末（过60目筛）约0.4 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20 mL，称定质量，超声提取（功率100 W，温度25 ℃）30 min，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液即得。

2.3 QAMS法学考察

2.3.1 系统适应性试验 在“2.1”项的色谱条件下，供试品中8个待测成分色谱峰峰形良好，与相邻峰的分离度大于1.5。混合对照品及供试品的色谱图见图1。

1-芒果苷 2-1,3,5,8-四羟基酮 3-swerpunilactone A 4-雏菊叶龙胆酮 5-1-羟基-3,7,8-三甲氧基酮 6-1-羟基-3,5-二甲氧基酮 7-1,8-二羟基-3,7-二甲氧基酮 8-1,8-二羟基-3,5-二甲氧基酮

表2 8种酮类成分的线性回归方程

2.4 相对校正因子（fs/i）的计算

表3 7个待测成分与芒果苷的fs/i

2.5 fs/i的重复性考察

2.5.1 不同仪器和不同色谱柱考察 实验分别考察了Waters 2695 I和Waters 2695II 2种高效液相色谱及Agilent C18（250 mm×4.6 mm，5 µm）、Alltima C18（250 mm×4.6 mm，5 µm）和Alltima C18TM（250 mm×4.6 mm，5 µm）3种色谱柱对s/i的影响，并计算RSD，结果均小于5%，表明s/i在不同的仪器和色谱柱适用性良好。结果见表4。

2.5.2 不同体积流量对s/i的影响 采用Waters 2695色谱仪和Agilent C18色谱柱考察了体积流量为0.8、1.0、1.2 mL/min时的s/i，并计算RSD，结果均小于5%，表明体积流量的波动对各成分s/i无显著影响。……