田 荣，吴 云，谷 巍，单鸣秋，谷宇琛，马丽杰，裴凌峰

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基于ITS2序列的海桐皮及其混伪品DNA分子鉴定

田 荣1，吴 云2#，谷 巍1*，单鸣秋1，谷宇琛1，马丽杰1，裴凌峰1

1. 南京中医药大学 药学院，江苏 南京 210023 2. 江苏康缘药业股份有限公司，江苏 连云港 222001

应用ITS2条形码技术，对海桐皮及其混伪品进行分子鉴定。通过提取31份海桐皮药材基原植物刺桐、乔木刺桐及其混伪品的基因组DNA，扩增ITS2序列并测序；同时从GenBank下载混伪品序列15种38条，运用MEGA 7.0软件进行序列比对，进行种间序列差异分析比较，并构建Neighbor-jioning（NJ）系统进化树，预测ITS2二级结构。在海桐皮2种基原中，刺桐的ITS2序列长度为232 bp，乔木刺桐的ITS2序列长度为230 bp，均为单倍型，可以明显区分；同时与其他刺桐属及易混品之间遗传距离较远。NJ树结果显示刺桐、乔木刺桐及其他易混品均单独聚为一支，表现出良好的单系性；依据ITS2二级结构，刺桐、乔木刺桐及其混伪品在4个螺旋区的茎环数目、大小、位置以及螺旋发出时的角度均有明显差异，可以直观地将刺桐与乔木刺桐，以及其与易混品进行区分。ITS2序列作为DNA条形码能稳定、准确鉴别海桐皮药材，为保障安全用药提供了新的技术手段。

海桐皮；刺桐；乔木刺桐；易混品；ITS2；物种鉴定

海桐皮为豆科植物刺桐L. var.(L.) Merr. 或乔木刺桐Roxb. 的干燥树皮。其味苦、辛，性平，具有祛风湿、通经络、杀虫等功效。主治风湿痹痛、痢疾、牙痛、疥癣。其也常用作抗菌剂、抗炎剂、退热剂及防腐剂‍[1]。化学研究发现海桐皮所含主要次生代谢产物为生物碱、黄酮及异黄酮类化合物‍[2]，其中黄酮及异黄酮类化合物有抗菌、抗炎、抑制Na‍+/H‍+交换系统活性及抑制磷脂酶A2的活性‍[3]。……