李彩琳，吕 鸿，张鸿翰，王彦权，彭 芳

美洲大蠊多肽逆转人肝癌HepG2/ADM细胞多药耐药性的作用及机制研究

李彩琳，吕 鸿，张鸿翰，王彦权，彭 芳*

大理大学药学院，云南省昆虫生物医药研发重点实验室，云南 大理 671000

探讨美洲大蠊多肽（PAE2）逆转人肝癌多药耐药细胞株HepG2/ADM的作用及机制。噻唑蓝（MTT）法检测HepG2/ADM细胞对不同化疗药物的耐药性以及PAE2联合化疗药物（5-氟尿嘧啶、阿霉素、环磷酰胺、长春新碱、奥沙利铂）对HepG2/ADM细胞增殖的影响；激光共聚焦观察PAE2对HepG2/ADM细胞中药物累积的影响；Western blotting法检测PAE2对HepG2/ADM细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X，Bax）、半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（cysteinyl aspartate specific proteinase 9，Caspase-9）、DNA修复酶（poly ADP-ribose polymerase，PARP）表达的影响；qRT-PCR法检测PAE2对多药耐药蛋白1（multiple drug resistance 1，MDR1）、乳腺癌耐药相关蛋白（breast cancer resistant protein，BCRP）和酶介导的多药耐药途径中蛋白激酶C（protein kinase C，PKC）、拓扑异构酶Ⅱ（topoisomerase Ⅱ，Top Ⅱ）的mRNA表达。PAE2抑制HepG2/ADM细胞增殖，呈时间和剂量相关性。PAE2可逆转HepG2/ADM对不同化疗药物的耐药性；PAE2可上调HepG2/ADM细胞中阿霉素水平，呈剂量相关性。PAE2可显著上调耐药细胞中Bax、cleaved Caspase-9 p37蛋白表达水平（＜0.05、0.01），显著下调Bcl-2蛋白表达水平（＜0.01），对cleaved PARP蛋白表达无显著影响。PAE2均显著下调HepG2/ADM细胞中、、、mRNA水平（＜0.01）。结论 PAE2可以通过减少药物外排、促进细胞凋亡、下调耐药蛋白表达等途径逆转HepG2/ADM细胞的多药耐药性。

美洲大蠊多肽；PAE2；肝癌；多药耐药；HepG2/ADM细胞

肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，死亡率位于全球癌症第3位[1]。临床治疗采用手术、放化疗、生物疗法以及多种方法的联用。由于肿瘤细胞对化疗药物产生多药耐药性（multi-drug resistance，MDR），从而降低药物疗效，抗肝癌药物的治疗效果无法显著提高。……