张云丽，王鑫，邵玲，曲波，赵鸿梅(辽宁省人民医院 中国医科大学人民医院检验医学科，沈阳 110016)

新型冠状病毒(2019-nCoV)是β属单股正链RNA病毒，巢病毒目，冠状病毒科[1]，国家卫生健康委员会发布的《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第七版)》中指出新型冠状病毒肺炎确诊病例的诊断标准为有流行病学史和临床表现的疑似病例同时具备病原学或血清学证据之一者。常用的病原学检测证据即为实时荧光RT-PCR检测2019-nCoV核酸阳性[2]。目前，大部分医疗机构建立了符合生物安全二级及以上标准的临床实验室均已相继开展新型冠状病毒核酸检测项目。

根据中国合格评定国家认可委员会(China National Accreditation Service，CNAS)《医学实验室质量和能力认可准则及其在分子诊断领域的应用说明(CNAS-CL02-A009)文件要求，临床实验室开展分子诊断检验项目前必须进行检测系统的性能验证，分子诊断领域中定性检测项目验证内容至少应包括测定下限、特异性、准确度、抗干扰能力等[3-4]。本研究按照CNAS-GL039《分子诊断检验程序性能验证指南》[5]，对中山大学达安公司生产的2019-nCoV核酸检测试剂盒进行性能验证，评价结果如下。

1 材料与方法

1.1样本来源 2019-nCoV RNA液体性能验证参考品(广州邦德盛公司)。浓度为2.0×106copies/mL及2.0×105copies/mL的2019-nCoV RNA假病毒核酸标准物质编号分别为GBW(E)091133及GBW(E)091132。

1.2试剂和仪器 核酸提取试剂、2019-nCoV核酸检测试剂(中山大学达安公司)；DA3200核酸提取仪(中山大学达安公司)，ABI 7500实时荧光PCR 仪(美国Applied Biosystems公司)。

1.3方法 按照核酸提取试剂盒说明书进行核酸提取，实时荧光RT-PCR测定按照2019-nCoV核酸检测试剂说明书操作，用ORF1ab基因和N基因作为检测靶标基因。……