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非洲猪瘟研究进展摘译

2021-01-05

河南畜牧兽医 2021年22期
关键词:宿主结构域猪瘟

非洲猪瘟病毒pE66L 蛋白可通过PKR/EIF2 途径抑制宿主翻译

非洲猪瘟病毒(ASFV)是对猪最具传染性和致命性的病毒之一,已在许多国家造成流行,近几年传播到中国,但目前尚未获得许可的疫苗或治疗方法。尽管科学家已进行了广泛研究,但ASFV编码的蛋白质如何抑制宿主翻译这一问题仍然未知。本文探讨了ASFV 干扰宿主翻译并优化自身基因表达的分子机制。

经研究,有14种ASFV蛋白对海肾荧光素酶(Rluc)活性的抑制作用超过5倍,其中抑制作用最强的是pE66L蛋白。结合生物信息学分析和生化试验结果,确定了pE66L的跨膜(TM)结构域(氨基酸13-34)在抑制宿主基因表达中的关键作用。另外,通过构建重组质粒,使TM结构域与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)相连,进一步证明该结构域可广泛抑制蛋白质合成;共聚焦试验和生化分析表明,TM结构域可帮助蛋白质定位到内质网(ER),之后激活PKR/eIF2α途径抑制宿主翻译。删除pE66L基因对病毒在巨噬细胞中复制几乎没有影响,但能显著恢复宿主基因的表达。

综上所述,ASFV 的pE66L 蛋白可通过激活PKR/eIF2 α通路诱导宿主翻译关闭。

某商品猪场非洲猪瘟暴发调查及传染源鉴定方法

非洲猪瘟(ASF)是一种由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的家猪和野猪传染病。近年来,这种疾病在全球广泛蔓延,给猪肉生产造成了严重的经济损失。本研究描述了在中国一个大型商业养猪场发生的非洲猪瘟疫情。

疫情始于2018 年,在集约化养猪场中呈时空传播。靠近出口的猪舍感染风险更高(优势比=14.4,95% CI:1.5-140)。据推测,疫病的传入是由于运输车辆被ASFV污染(该车辆曾用于销售生产率较低的生猪)。本项调查显示了ASFV 感染和在假定有足够生物安全措施环境中的传播过程,将有助于大型养猪场控制ASF。

基于P30单克隆抗体的非洲猪瘟病毒胶体金试纸条的制备

由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的非洲猪瘟(ASF)于1921 年在肯尼亚首次报道,但目前仍没有有效的疫苗或抗病毒药物。快速和有效的诊断是处理ASF 疫情的关键。本研究制备了两株针对ASFV磷蛋白P30的单克隆抗体(MAbs),分别命名为3H7A7和6H9A10。

表位分析显示MAb 3H7A7 和6H9A10 分别识别P30的aa 144-154和aa 12-18。基于这2株单克隆抗体,科研人员开发了用于快速检测ASFV 的胶体金试纸条。灵敏度和特异性分析表明,该条带的检出限为2.16 ng P30,且该试纸条仅与ASFV 反应,与其他常见猪病毒无交叉反应。通过检测153份临床现场样本(包括血清、血浆、组织和抗凝血处理过的血液),本试纸条与Real-time PCR 的一致性为95.42%。

冻干粉实时定量PCR检测中国家猪血液样本中非洲猪瘟病毒的新方法

非洲猪瘟(ASF)是一种严重的猪传染病,给中国造成了巨大的经济损失。因此,迫切需要开发一种快速、特异、灵敏的诊断方法检测非洲猪瘟病毒(ASFV)。本研究建立了一种新型的实时定量PCR 方法,该方法利用冻干粉末试剂(LPR),以主要结构蛋白P72为靶点,可用于ASFV的快速检测。

经试验,该方法对ASFV 质粒模板的灵敏度为100拷贝/ul,比OIE 推荐的qPCR 方法灵敏度高10 倍;特异性分析表明,针对ASFV 的qPCR-LPR 与其他重要的猪病原体没有交叉反应;在我国218 份家猪血液样本的临床诊断中,本试验建立的qPCR-LPR 方法和商用qPCR 试剂盒检测ASFV 的阳性率分别为80.73%(176/218)和76.61%(167/218),经SPSS 分析,两种方法的符合率为92.20%(201/218),kappa 值为0.768(p<0.0001),两种检测方法的总体一致性为95.87%(209/218),进一步的Pearson 相关和线性回归分析显示两种方法之间有显著的相关性,R2值为0.9438。本研究建立的qPCR-LPR 方法,可在2 h 内完成从样本处理到结果报告的整个过程。

以上结果表明,qPCR-LPR检测是一种很好的实验室诊断工具,可以灵敏有效地检测ASFV。

2019-2020 年越南流行的非洲猪瘟病毒(ASFV)的分子特征

非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种高度传染性动物疫病。为了确定在越南传播的ASFV菌株之间的遗传变异关系,对2019-2020 年从越南北部、中部和南部23个不同省份采集的家猪器官和血液样本中的26株ASFV分离株进行了遗传特征分析。

对部分B646L(p72)和EP402R(CD2v)基因序列以及全长E183L(p54)基因序列的分析表明,所有26 株ASFV分离株均属于基因型II和血清型VIII,这与Georgia/2007/1和中国所有测序菌株一致。I73R 和I329L 基因之间的TRS 包含10 个核苷酸的插入,这与2018 年从家猪分离的中国ASFV株CN201801一致,但在Georgia/2007/1和中国/吉林/2018株中未观察到。□

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