王前玉，戚玉芹，高 晓，毛学源，仲竹娟，时潇洋

（宿迁市第一人民医院病理科，江苏223800）

钙粘蛋白超家族是一组钙依赖性膜表面糖蛋白分子，主要介导细胞粘附、胚胎发育，并维持正常组织器官形态。钙粘蛋白表达缺失是多种疾病的分子病理基础。人类肝肠黏着蛋白（human liver-intestine cadherin protein，CDH17）也被称为肠肽相关转运子HPT-1，肝肠钙粘蛋白（liver-intestine cadherin，Licadherin）[1]，最初是在小鼠肝脏发现的一类钙依赖性粘附分子。有研究证实，CDH 17 在人十二指肠（伯纳特腺除外）、回肠、结直肠以及阑尾上皮细胞中表达，在胃体和胃窦等组织中不表达，但在肠上皮化生的胃黏膜偶有表达[2]。最近有研究证实，CDH 17 不仅与胃癌的预后有关[3]，同时还是胃癌比较可靠的诊断标志物[4]。本文采用免疫组化方法对胃癌肿瘤组织进行研究，进一步明确CDH 17 及尾型同源盒转录因子-2（caudal-related homeobox transcription factor 2，CDX-2）在胃癌中的诊断价值及临床病理意义。

1 材料与方法

1.1 材料 收集宿迁市第一人民医院病理科2015年12月—2019年2月手术切除和内镜活检胃组织石蜡标本，其中胃癌组织133例，正常胃黏膜上皮组织97例。所有组织标本由本院2 位高年资病理诊断医师确诊。

1.2 主要试剂 兔抗人CDH 17（EP86）单克隆抗体（中杉金桥生物技术有限公司），兔抗人CDX-2（EPR2764Y）和CerbB-2（EP3）单克隆抗体（福州迈新生物技术有限公司），均为即用型抗体。HRP 标记的鼠兔通用型二抗、DAB 显色液（福州迈新生物技术有限公司）。

1.3 实验方法 免疫组织化学染色采用Maxvision两步法。3～4 μm 石蜡切片经脱蜡、水化，高温高压抗原修复（10%柠檬酸盐抗原修复缓冲液，pH 6.0）。每张切片加50 μL 一抗，4 ℃冰箱内孵育过夜。PBS 冲洗，每张切片滴加50 μL Maxvision 试剂（二抗），室温下孵育30 min。DAB 显色，苏木素衬染，中性树胶封片镜检。

1.4 结果判读 CDH 17、CerbB-2 表达定位于细胞膜，CDX-2 阳性定位于细胞核。CDH 17、CDX-2 染色结果判读：计数10个高倍视野，计算平均阳性细胞数，按阳性细胞所占比例分为：<1%为（-），1%～25%为（1+），26%～50%为（2+），50%～100%为（3+），（1+）～（3+）均按阳性统计。CerbB-2 染色结果判读和评分标准：（1）全部为（-）或＜10%肿瘤细胞膜染色，判为（-）（0）；（2）>10%肿瘤细胞微弱或隐约可见膜染色，仅有部分细胞膜染色，判为弱（+）（1+），CerbB-2 蛋白过表达情况评估为（-）；（3）＞10%肿瘤细胞有弱至中度的基底侧膜、侧膜或完全性膜染色，判为（+）（2+），CerbB-2 蛋白过表达情况评估为不确定；（4）＞10%肿瘤细胞基底侧膜、侧膜或完全性膜强染色，判为强（+）（3 +），CerbB-2 蛋白过表达情况评估为（+）。CerbB-2 染色结果判读（1）、（2）、（3）为阴性，（4）按阳性统计。

1.5 统计学处理 应用STATA 12.0 统计学软件进行数据处理分析，计数资料以频数表示，组间比较采用χ2检验。P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 CDH 17 在胃癌组织和正常胃黏膜中的表达 CDH 17 在胃癌组织中阳性表达率为61.6%（82/133），高于正常胃粘膜上皮细胞阳性表达率8.2%（8/97），差异具有统计学意义（χ2=67.1695，P＜0.001）。同时发现CDH 17 仅表达在发生肠化生的良性胃粘膜上皮细胞，而未发生肠上皮化生的良性胃粘膜上皮细胞则阴性。

表1 CDH 17 表达与胃癌临床病理特征的相关性例

2.2 CDH 17 表达与胃癌临床病理特征的相关性 胃癌组织中CDH 17 表达与肿瘤临床分期、Lauren分型以及淋巴结转移具有相关性（P＜0.05），与患者年龄、性别、肿瘤直径、CerB-2 表达无相关性。见表1。2.3 CDH17 和CDX-2 在胃癌中的表达差异 CDH 17在胃癌中表达阳性率为61.6%（82/133），高于CDX-2 阳性表达率45.9%（61/133），差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨 论

CDH 17 是由CDX-2 调控的细胞粘附分子，与肿瘤的侵袭和转移有关[5]。体内和体外实验表明，CDH 17 是胃癌促癌基因，抑制CDH 17 表达可以抑制胃癌细胞增殖，增加胃癌细胞凋亡[6]。有研究显示，在胃癌组织中HOXA 13 能上调CDH 17 表达，下调HOXA 13 和CDH 17 均能够抑制胃癌细胞的增殖和侵袭[7]。

本研究发现胃癌组织中CDH 17 阳性率为61.6%，而在正常胃粘膜组织仅为8.2%，差异有统计学意义（P＜0.05）。王宾等[8]研究显示CDH 17 在胃癌中阳性率为63.26%，与本文结果相似。CDH 17 表达于正常小肠和结直肠粘膜上皮细胞，而在胃体和胃窦组织中不表达[2]。本研究显示CDH 17 在正常胃粘膜极少表达，偶见表达在发生肠上皮化生的胃粘膜上皮细胞。因此，CDH 17 表达是否提示胃粘膜肠上皮细胞有癌变可能，需要进一步做相关工作。

本研究对CDH 17 与胃癌临床病理特征的相关性进行分析，发现CDH 17 与较高的临床分期、淋巴结转移以及肠型胃癌相关。Tu 等[9]分析204例胃癌患者CDH 17 的表达，结果发现CDH 17 阳性更容易具有如下病理特征：肿瘤直径大于5 cm，肠型胃腺癌，较高的临床分期和远处转移。也有研究显示，CDH 17 的表达是胃癌1 期或淋巴结无转移患者的一个独立预后因素[10]。本研究的结论与文献报道既有相似之处，也不完全一样，可能是因为胃癌本身存在异质性，但均提示CDH 17 是一个癌基因，与肿瘤侵袭和转移有关。

CDH 17 是结直肠癌标志物，在结直肠癌中阳性率极高，但胃癌中的阳性率各研究组报道的结果不尽相同[1，11]。Altree-Tacha 等[4]研究显示胃癌中CDH 17 阳性率64%，高于CDX-2 和CK20，认为CDH 17是一个比CDX-2 更敏感的胃癌诊断标志物，CDH 17 在胃肠道外的腺癌中极少阳性表达。SU 等[6]发现CDH 17 在胃癌中阳性率为56%，在结直肠癌中阳性率为96%，但在肺腺癌和卵巢浆液性癌中未见表达。本研究结果显示，CDH 17 在胃癌中的阳性率为61.6%，高于CDX-2 的阳性率45.9%，差异有统计学意义（P＜0.05）。