黄小琼,严家荣,郑佳琳,武昕,谭巧燕,饶子亮,王诺,王刚

（广东省医学实验动物中心，佛山528248）

传递窗紫外线灯消毒是动物实验屏障设施传递实验物品常用消毒方法，主要是对空气及物体表面进行消毒，我们在使用过程中发现,在紫外线消毒使用上存在一些认识误区、潜在隐患和浪费等现象,使紫外线灯杀菌效果受到很大影响,[1]造成屏障设施的交叉污染和资源浪费，如何正确使用传递窗紫外线消毒是确保物品、空气消毒效果和节能并延长紫外灯寿命的关键。因此本研究选择不同物品处理及不同作用时间对其消毒效果进行对比试验，对传递窗紫外灯最佳照射时间和方法进行探讨，综合考虑消毒成本、稳定性、消毒效果和安全性等多方面因素，达到紫外灯在实际应用中延长寿命、节省成本、防止交叉污染的目的，同时为实际工作中的消毒灭菌工作提供科学有效、经济安全的参考依据。

1 材料和方法

1.1 检测物品：消毒药瓶、纸张、眼镜和签字笔。

1.2 主要实验仪器与试剂

1.2.1 主要实验仪器：

1.2.1.1 ZSZ15W 直管型石英紫外线低压汞消毒灯（石英杀菌灯）：启东市海联有限公司生产。批号：2007，卫消字（2002）第0103 号。

1.2.1.2 JJ1006 型电子天平，中国双杰集团有限公司；SW-CJ-2FD 型超净工作台，苏州净化有限公司；PHX 型生化培养箱，宁波莱福科技有限公司产品；BHC-1300ⅡA/B3 型生物安全柜，苏州安泰空气技术有限公司产品；LMQ.C 型全自动灭菌器，山东新华医疗器械有限公司产品；DK-8AD型电热恒温水槽，上海一恒科技有限公司产品；MS3 型迷你振荡器，德国IKA 公司产品。

1.2.2 主要试剂：氯化钠，批号130316，广州市中南化工仪器有限公司产品，有效期至20180315；血平板，批号BAP-140414D，广州市迪景微生物科技有限公司产品，有效期至20140601；营养琼脂，批号3102441，广东环凯微生物科技有限公司产品，有效期至20160801；平板计数琼脂，批号3102275，广东环凯微生物科技有限公司产品，有效期至20160602；甘露醇，批号5101420，广东环凯微生物科技有限公司产品，有效期至20150519；冻干血浆，批号1301101P，广东环凯微生物科技有限公司产品，有效期至20141011。

1.3 实验方法[2]

1.3.1 培养基的配制

1.3.1.1 营养琼脂平板：准确称取16.5 g 营养琼脂培养基，溶于500 mL 去离子水中，搅拌加热煮沸至完全溶解，调PH 值为7.2，121℃高压灭菌15min，冷却至45℃左右倾倒平板，每皿20mL 左右，备用。

1.3.1.2 平板计数琼脂：准确称取16.5 g 平板计数琼脂培养基，溶于500 mL 去离子水中，搅拌加热煮沸至完全溶解，调PH 值为7.2，121℃高压灭菌15min，至46℃水浴中备用。

1.3.2 检测地点：传递窗1：传递窗1 四个方向各安装1 支直管型石英紫外线低压汞消毒灯，共安装4 支。已经使用时间：1730min，传递窗2：传递窗1 四个方向各安装1 支直管型石英紫外线低压汞消毒灯，共安装4 支，为新购买的紫外灯（使用时间为0min）。照射强度为2537°A。

1.3.3 物体表面消毒效果测定：

1.3.3.1 采样：分别设阳性对照组 （未作任何处理）、试验组0（照射前）、试验组1（紫外线灯照射15min）、试验组2（紫外线灯照射20min）、试验组3（紫外线灯照射30 min）、试验组4（紫外线灯照射60min），每组设两个平行管。将经过0.17%百毒杀消毒液擦拭的签字笔、百毒杀瓶，0.1%新洁而灭浸泡3 分钟的眼镜和不做处理的纸等待测物品置传递窗照射相应时间后，用沾湿生理盐水的无菌棉拭子对物体表面作涂抹采样，百毒杀瓶采样面积3.5cm×14cm、笔11cm×2cm、纸7cm×21cm 和眼镜3cm×5cm、每支采样2 个点。

1.3.3.2 物体表面菌落总数测定：将已采样的棉拭子无菌操作剪下棉拭子头，放入10mL 生理盐水中洗脱，充分振荡混匀，取洗脱液适当稀释。选择合适稀释度的洗脱液匀液，取1mL 置无菌平皿，每个稀释度做两个平行，倾入冷却至45℃左右的平板计数琼脂，混匀，待琼脂凝固后翻转平皿置36℃培养48h。

1.3.3.3 物体表面金黄色葡萄球菌检测：用含转运培养基的棉拭子，对物体表面进行涂抹采样。用棉拭子在血平板上进行划线接种，置36℃培养24h。观察菌落特征，金黄色葡萄球菌在血平板上菌落呈金黄色或白色，突起，圆形，不透明，表面光滑，β 溶血；革兰氏染色镜检观察到菌体为革兰氏阳性球菌，排列成葡萄状，无芽胞与荚膜。挑取可疑菌落划线接种于血平板，置36℃培养24h。挑取可疑的分纯菌落接种甘露醇培养基，置36℃培养24h，发酵甘露醇产酸者为阳性。于0.5 mL 1：4 兔血浆加入待检菌24h 肉汤培养物0.5 mL，摇匀，同时用已知的血浆凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养物各0.5 mL 作为阳性与阴性对照。置36℃培养箱内，每30min 观察一次，若24h 内，阴性菌未出现凝块，已知的阳性菌株和待检菌株均出现凝固时或有凝块时，可判断为阳性。

1.3.3.4 结果判定：根据细菌消亡率对消毒效果进行评价。消亡率＝〔（消毒前菌落数－消毒后菌落数）/消毒前菌落数〕×100%[3－5]。

2 统计方法

采用Excel 软件统计数据。

3 结果

检测结果表明（见表1），签字笔、眼镜、百毒杀瓶和A4 纸张在四面有紫外灯管的传递窗中照射消毒15 分钟，细菌消亡率均可达到100%。符合消毒合格标准。表1传递窗紫外灯不同照射时间消毒效果

表1 传递窗紫外灯不同照射时间消毒效果

4 讨论

紫外线(ultraviolet radiation，UV)消毒经济实用、安全方便、效果确切、无残留毒性。是空气和物品表面消毒的首选。但UV 辐照能量低，穿透力弱，不能透过纸张、普通玻璃和有机玻璃;易被粗糙表面、有机物和尘埃所吸收，对一般塑料透过率极低，照射距离等反光罩材质、灯管清洁度、消毒物体表面性质和环境温湿度因素影响[6]。屏障设施传递窗紫外灯的如何使用可达到消毒合格，防止交叉污染又可延长紫外灯寿命、节约成本的目的。选择最佳照射时间是关键。

本研究检测了紫外灯照射15min、20min、30min 和60min 照射实验物品表面的细菌消亡率。检测结果表明（见表1），签字笔、眼镜、百毒杀瓶和A4 纸张在四面有紫外灯管的传递窗中照射消毒15 分钟，细菌消亡率均可达到100%。符合消毒合格标准。为实际工作中的消毒灭菌工作提供科学有效、经济安全的参考依据。但如何做好紫外灯的日常维护，使影响因素降到最低，延长紫外灯管寿命。同时为了防止交叉污染，如何对紫外灯管的寿命进行日常监测有待进一步研究[7]。