刘 静，宋婷婷，瞿红颖，贾 兴，耿智霞，郭李珉，刘 欣★，魏占勇，曹兴元

（1.河北远征药业有限公司/河北省兽药技术创新中心，河北石家庄050041；2.中国农业大学，北京100193）

泰地罗新是最新动物专用的大环内酯类半合成抗生素，抗菌谱广，在体外抗菌试验中，除了对引起猪呼吸道疾病的敏感菌有效外，对一些革兰氏阳性和阴性菌也有较好的抗菌活性[1-3]。泰地罗新吸收快、达峰时间短、生物利用度高、肺组织浓度高、消除半衰期长，药效持久，在兽医临床具有广阔的应用前景[4-5]。目前，国内未见泰地罗新注射液的安全性评价研究，本文根据兽药指导原则急性毒性试验要求[6]，研究了泰地罗新注射液在SPF 级SD 大鼠、ICR 小鼠体内经腹腔注射给药后的急性毒性，为新兽药的研发和临床用药提供了科学依据，保证用药安全。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂 泰地罗新注射液：河北远征药业有限公司生产的中试产品 （规格：50 ml:2.0 g，批号：TILDI4-1-03）。均用注射用水稀释至适宜倍数后使用。

1.2 试验动物 选取60 只健康SPF 级SD 大鼠，雌雄各半，体重190 ± 10 g；60 只健康SPF 级ICR 小鼠，雌雄各半，体重20±2 g，均购自北京维通利华动物科技有限公司 （合格证号SCXK（京）2016-0011）。饲料购自北京科奥协力饲料有限公司。试验鼠购入后观察饲养一周，投入试验。农业部兽药安全监督检验测试中心（北京）动物房实验动物使用合格证号：SYXK （ 京）2016-0008。试验鼠自由采食和饮水，饮用水为无菌水，雌雄动物分笼饲养；饲养温度控制在22±3 ℃之间，相对湿度控制在50%～60%；光照强度控制在200～300 勒克斯；光源采取人工明暗各12 h；氨浓度控制在14 mg/m3以下；噪声控制在50 分贝以下。

1.3 方法

1.3.1 大鼠急性毒性试验 将60 只大鼠随机分成6 组，每组10 只，雌雄各半。根据预试验的结果，确定给药组剂量分别为10mL/kg、8.7mL/kg、7.6 mL/kg、6.6 mL/kg、5.7 mL/kg、5.0 mL/kg。将受试物原液用注射用水稀释后腹腔等体积注射染毒，染毒后观察大鼠的一般表现、中毒症状和死亡情况。

1.3.2 小鼠急性毒性试验 将60 只大鼠随机分成6 组，每组10 只，雌雄各半。根据预试验的结果，确定给药组剂量分别为10mL/kg、7.6mL/kg、5.7 mL/kg、4.4 mL/kg、3.3 mL/kg、2.5 mL/kg。将受试物原液用注射用水稀释后腹腔等体积注射染毒，染毒后观察大鼠的一般表现、中毒症状和死亡情况。

1.3.3 血浆采集及处理 正式试验试验动物染毒后一般观察7 d，若染毒4 d 后继续有死亡的，则需观察14 天，必要时可延长观察至28 d，动物中毒观察项目参考兽药指导原则急性毒性试验要求[6]，并对死亡大鼠、小鼠进行剖检，做好记录。如所有试验动物均未死亡，则试验结束时每组随机挑选2 只受试动物进行大体剖检并做好记录。

1.3.4 数据处理与分析 采用改良寇氏计算法计算LD50值及95%可信限。

2 结果与分析

2.1 大鼠急性毒性试验结果

2.1.1 中毒症状 正式试验中受试SD 大鼠在给予受试物后出现伏卧，少动，蜷缩等中毒症状；10 min 后开始出现死亡现象，死亡大鼠在给药24 h内死亡，其中高剂量组在给药后1 h 全部死亡。各组动物的具体临床表现和死亡情况详见表1和表2。

表1 动物临床症状结果

表2 动物死亡结果

2.1.2 病理结果 对死亡大鼠大体剖检，其心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃肠道等组织器官均未见异常变化，各组动物大体剖检结果详见表3。

表3 动物大体剖检结果

雌性 6.6 所有剖检动物未见异常变化组5 雄性 5雌性 5.7 所有剖检动物未见异常变化.7 所有剖检动物未见异常变化组6 雄性 5.0 所有剖检动物未见异常变化雌性 5.0 所有剖检动物未见异常变化

2.2 小鼠急性毒性试验结果

2.2.1 中毒症状 ICR 小鼠在染毒后10 min 出现行动迟缓、蜷缩、抽搐等中毒症状，在染毒2 h 后开始出现死亡，死亡动物均在24 h 内出现死亡，各组动物的具体临床表现和死亡情况详见表4和表5。

表4 动物临床症状结果

表5 动物死亡结果

2.2.2 病理结果 对死亡小鼠大体剖检，其心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃肠道等组织器官均未见异常变化，各组动物大体剖检结果详见表6。

表6 动物大体剖检结果

3 讨论

有文献资料显示[7-9]，小鼠在口服泰地罗新剂量到1700 mg/kg.bw 时无任何不良反应。大鼠在口服泰地罗新剂量达到2000 mg/kg.bw 时，皮毛会出现轻度至中度皱褶，轻度至中度镇静作用，驼背，轻微不协调，眼睑半闭或完全闭合，并出现严重鼻漏，但是这些不良反应都是可逆的，尸检无肉眼可见的病变。小鼠静脉注射泰地罗新时，当给药剂量达到12.5 mg/kg.bw 或者更高时，有小鼠立即死亡。这些小鼠表现出严重的协调丧失。综上所述，泰地罗新急性毒性较低（口服剂量达到2000 mg/kg.bw），小鼠静脉注射有中度急性毒性（6.25＜LD50＜12.5 mg/kg.bw）。这些报道为本试验提供了参考依据。

本研究中大鼠腹腔注射泰地罗新预试验过程中，100%致死剂量为10 mL/kg，0%致死剂量为5mL/kg，因此确定各组剂量分别为10、8.7、7.6、6.6、5.7、5.0 mL/kg。试验结果表明，大鼠腹腔注射泰地罗新的LD50为7.46 mL/kg.bw，死亡均发生在24 h 以内，存活动物均表现行动迟缓、蜷缩、少动的特征，所有剖检动物未见异常变化；小鼠腹腔注射泰地罗新预试验过程中，100%致死剂量为10 mL/kg，0%致死剂量为2.5mL/kg，因此确定各组剂量分别为10、7.6、5.7、4.4、3.3、2.5mL/kg。试验结果表明，小鼠腹腔注射泰地罗新的LD50为4.77 mL/kg.bw，死亡均发生在24 h 以内，存活动物均表现行动迟缓、蜷缩、抽搐的特征，所有剖检动物未见异常变化。

4 结论

本研究中泰地罗新注射液的急性毒性试验结果：对大鼠腹腔注射急性毒性LD50为7.46 mL/kg.bw，LD5095%的可信限为6.99～7.97 mL/kg.bw；按泰地罗新折算 （50mL:2 g）LD50 为298.40 mg/kg.bw，LD50 95%的可信限为279.60 ～318.80 mg/kg.bw。对小鼠腹腔注射急性毒性LD50为4.77 mL/kg.bw，LD5095%的可信限为4.12～5.52 mL/kg.bw；按泰地罗新折算 （50mL:2 g）LD50为190.08 mg/kg.bw，LD5095 %的可信限为164.80 ～220.80 mg/kg.bw。根据兽药指导原则[6]急性毒性试验剂量分级标准，该产品属于中等毒级，为新兽药的研发和临床用药提供了科学依据，保证用药安全。