张作松 施震地

摘 要：采用液相色谱法对食品中添加的苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐、糖精钠和安赛蜜进行检测。样品加水混匀后再添加蛋白质沉淀剂亚铁氰化钾和乙酸锌以去除蛋白质，再超声、离心提取，上清液过0.22 μm滤膜制成待测样品，经过C18色谱柱分离，流动相为甲醇-乙酸铵溶液（体积比为8∶92），等梯度洗脱，26.2 min实现4种待测物的有效分离。加标浓度分别为1、5、10 mg/kg时，加标回收率在78.3%～117.4%，相对标准偏差（RSD）在1.6%～4.1%，本方法可用于检定食品中的上述4种添加剂。

关键词：液相色谱;苯甲酸;山梨酸;糖精钠和安赛蜜;添加剂

食品很容易因为温湿度、环境等出现变质，给企业带来巨大经济损失，也会制约食品行业发展。防腐剂的添加很好地延长了食品的保质期，因此被广泛添加到食品中。目前常添加的有苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐、丙酸及其盐、脱氢乙酸等。甜味剂能够改善口感进而增加食欲，常用的甜味剂有糖精钠、安赛蜜、阿斯巴甜、纽甜与阿力甜等[1]。近些年的研究表明食品添加剂超量使用也会危害人体健康，食品安全国家标准对防腐剂和甜味剂的添加量作出明确规定，以保证食品安全[2]。本文采用液相色谱法同时测定食品中所添加的苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐、糖精钠和安赛蜜。

1 试验部分

1.1 儀器与试剂

Waters allianc acquity e2695液相色谱仪;涡旋混合器;HR/T20 MM立式高速冷冻离心机;KH-250DB数控型超声波清洗器。甲醇（HPLC纯）;乙酸铵、亚铁氰化钾、乙酸锌均为分析纯;标准试剂：山梨酸、安赛蜜、苯甲酸、糖精钠纯度均>99%。

1.2 色谱条件

色谱柱：C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）;流动相：甲醇+乙酸铵溶液=8+92;柱温：35 ℃;进样量：10 μL，检测波长：230 nm;流速：1 mL/min。

1.3 样品前处理

取2.5 g左右样品于50 mL离心管中，加入25 mL水涡旋振荡，加入2 mL 10.6%的亚铁氰化钾溶液涡旋20 s混匀，再加入2 mL 22%的乙酸锌溶液涡旋1 min后定容至刻度线，超声30 min，于10 000 r/min离心10 min，上清液转移至50 mL容量瓶中，残渣再加水混匀后离心提取一次，上清液合并至原容量瓶中，用水定容至刻度线混匀，取上清液2 mL过

0.22 μm滤膜，供液相色谱上机检测。

2 结果与讨论

2.1 流动相条件的选择

参照GB 5009.28-2016《食品安全国家标准 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定》检测标准，通过改变甲醇的比例[1]对比验证标准品目标峰的分离和出峰时间，最后确定流动相条件为：甲醇+乙酸铵溶液=8+92。

2.2 标准曲线的建立与分析

准确称取标准品（精确到0.000 1 g），以空白样品为基质制备基质空白标准溶液，用空白标准基质配制成梯度为1、5、10、25、50、100 mg/L与200 mg/L

的混合系列标准工作液，使用前配制，然后对标准工作液进行检测。图1是4种标准品的色谱图，从图1中可以看出，安赛蜜、苯甲酸、山梨酸和糖精钠的出峰时间分别在10.68、12.41、17.13 min与26.24 min，实现了4种样品的同时检测。将色谱检出的峰面积与标准溶液浓度进行拟合，计算出目标物的线性回归方程、相关系数、线性范围和检出限，如表1所示。4种样品拟合曲线的线性相关系数达到0.999以上。回收率试验的加标浓度分别为1、2.5、5 mg/kg，每份样品分别重复测定4次，结果表明样品的平均回收率在78.3%～117.4%，相对标准偏差（RSD）在1.6%～4.1%。

3 结论

本文通过液相色谱法检测食品中的苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐、糖精钠和安赛蜜，参考GB 5009.28-2016《食品安全国家标准 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定》，为防腐剂和甜味剂的检测提供了一种高效、快捷的检测方法。利用液相色谱技术建立了同时测定多组分防腐剂和甜味剂的方法，提高了检测效率、缩短了样品的检测时间，并能确保检测结果的准确性，这也为以后的食品检测工作提供了思路上的借鉴。

参考文献

[1]中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会，国家食品药品监督管理总局.GB 5009.28-2016食品安全国家标准食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定[S].北京：中国标准出版社，2017.

[2]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.SN/T3538—2013出口食品中六种合成甜味剂的检测方法液相色谱一质谱/质谱法[S].北京：中国质检出版社，2013.