饲料中添加中药草和抗生素对重组禽流感三价灭活疫苗免疫抗体的影响

2020-11-20王会生王文会杜逢艳韩庆彦

中国动物保健 2020年8期

王会生，王文会，杜逢艳，韩庆彦

（1.礼县畜牧兽医站甘肃陇南 742200；2.甘肃省礼县上坪乡畜牧兽医站甘肃陇南 742200；3.甘肃省动物疫病预防控制中心兰州 730046）

陇南某县是传统的养鸡大县，近年来随着精准扶贫养鸡和林下养鸡的发展，养殖规模越来越大，由于饲养管理和鸡病防治上的偏差，在饲料添加及疾病防治中过多使用了抗生素。减少抗生素的使用，可以减少饲养户的负担，还能生产出健康的畜产品。如果能使高致病性禽流感和新城疫等疫苗的免疫效果更好，也能在生产中促进减少抗生素的使用。

在饲料中添加中草药，可防病治病，毒副作用小，不会在食用畜禽产品中产生有害残留，还可避免过多使用化学药物造成病原微生物产生抗药性、畜产品药物残留和环境污染等问题。一些中草药还具有提高免疫功能的作用，现已发现天然中草药中的多糖类、有机酸类、生物碱类、甙类和挥发油类等均有增强免疫力的作用，这类中草药有黄芪、刺五加、党参、商陆、马兜铃、甜瓜蒂、当归、淫羊藿、穿心莲、大蒜、茯苓、水牛角、猪苓等[1]。研究表明，长期使用抗生素将抑制鸡免疫器官发育，免疫功能下降，容易感染疾病[2]，干扰免疫球蛋白合成，降低细胞吞噬作用，降低体内淋巴细胞有丝分裂活性[3]。

本试验通过对相同日龄相同饲养条件下散养肉鸡饲料中添加抗生素和中草药，来了解两种添加物对重组禽流感三价灭活疫苗（H5N1Re-11 株+Re12 株，H7N9H7-Re2 株）免疫抗体的影响。

1 试验鸡及方法

1.1 试验地点及鸡群

选择一个散养肉鸡场，该场主要饲养青脚麻鸡，从兰州某大型商品肉鸡场购进7 日龄雏鸡苗，本试验选择的120 只雏鸡，自2019年12 月31 日引进，2020 年4 月2 日出售，饲养期92d，日龄99d。

1.2 试验方法

1.2.1 鸡群的饲养管理将120 只雏鸡分成三组，三组鸡分群笼养，除饲料外，其余饲养管理条件完全相同。其中第一组（A 组）35只，饲喂以补中益气汤为主的中药方剂，饲料按照每10kg 饲料添加黄芪、党参、炙甘草各15g、白术、当归各10g、陈皮5g、柴胡12g、生姜8g、大枣适量，以上中药研磨成粉后添加到饲料中。第二组（B组）35 只，饲喂含土霉素的饲料，饲料中土霉素含量150mg/kg。第三组（C 组）50 只，饲喂对照饲料，饲料中不含抗生素及免疫增效剂。

第一组和第二组鸡群饲养至15 日龄时，饲喂相应的饲料，直至采血次日，换成对照饲料。

1.2.2 疫苗注射在鸡群养殖到21 日龄时，注射重组禽流感三价灭活疫苗（H5N1Re-11 株+Re12 株，H7N9H7-Re2 株）,由肇庆大华农生物药品有限公司生产，批号1924198，该疫苗由上级动物防疫机构配发。

1.2.3 血清采集疫苗注射后21d 时，每组随机采集20 份血样，采血部位在鸡的翅静脉，每组鸡的最低采血数量不少于20 只，用一次性真空采血管每只鸡采血在2mL 以上，采完后斜面放置，待全部凝固后放置于4℃冰箱过夜，第二天用移液器吸取析出的血清进行禽流感H5 亚型（Re-11)抗体效价测定。

2 检测方法

2.1 检测方法及抗体合格标准

采用血凝（HA）和血凝抑制(HI)试验法，参照高致病性禽流感诊断技术GB/T18936—2003[4]。抗体滴度≥4log2 为合格，＜4log2为不合格。

2.2 试剂和材料

禽流感病毒H5 亚型（Re11 株）血凝抑制试验检测试剂，哈尔滨维科生物技术有限公司生产，批号2019004。

被检血清从历年笔者检测的抗体结果来看，禽流感灭活苗免疫后的抗体效价不会在14d 左右达到峰值，一般都在19d 左右达到峰值，因此选择接种疫苗后21d，而不是常见的15d，采集血样60份，其中每个试验组（中药组、抗生素组和对照组）各20 份血清试验材料90°和110°V 型8*12 孔反应板若干，10-300μL 单道、8道和12 道移液器各一把，无菌移液枪头若干。