杨通静，王 沁

（贵州省农作物品种资源研究所,贵州贵阳 550006）

天麻是具有内生菌根的兰科植物。它的植物体没有根与绿叶，种子萌发后，主要依靠分解侵入其体内的蜜环菌菌丝生活[1]。因此，天麻的有丝分裂标本制作不能像其他植物那样选用根、叶等组织结构制备[2-4]。1984年梁汉兴[5]以花粉小孢子观察了原天麻染色体单倍体数目。2010年王德信[6]也以花粉小孢子为材料，观察减数分裂过程中的细胞学特征。鉴定出天麻单倍体的染色体数目为18，但天麻染色体特征不能较好的呈现，也无法鉴定天麻的染色体倍数。为了有效观察天麻染色体特征和鉴定其倍性，笔者拟从天麻不同组织、不同时间取样制片，筛选出最佳取材部位，用于观察天麻染色体有丝分裂中期的结构特征。

1 材料与方法

1.1 材料

品种：纯化4代以上的红秆天麻。培育地点：天麻种质资源圃。种质来源：贵州省农作物品种资源研究所真菌室课题组。

1.2 方法

1.2.1 材料培养方法

（1）天麻花柱头培养

将成熟天麻（鹦哥嘴完整无损伤）块茎埋于湿度在40%左右沙土中，置于22-25oC，相对湿度60%的环境下，让其抽薹。

（2）花粉帽培养

将成熟天麻（鹦哥嘴完整无损伤）块茎埋于湿度在40%左右沙土中，置于22-25oC，相对湿度60%的环境下，让其抽薹。

（3）原球茎培养

将刚采摘（每年的5-7月）的成熟的天麻种子与萌发菌进行拌种，置于培养好的固定菌床中覆土培养，自然条件下萌发，取不同大小的原球茎在不同时间段进行观察比较。

（4）初生茎

成熟天麻块茎的鹦哥嘴人为掰断后，将其块茎埋于湿度在40%左右沙土中，自然条件下生长，在不同时间取不同块茎大小制片观察。……