龚珂珂，李丰哲，王 红，王富安

(武汉大学化学与分子科学学院，湖北武汉 430072)

1 引言

癌症是一种危害人类健康的重要疾病。虽然相关诊疗方法已经取得了一定的进展，但是癌症仍然是导致我国人口死亡的主要原因之一。MicroRNA(miRNA)长约18～25个碱基，具有高度保守性，是一类在真核细胞中发现的内源性单链非编码RNA[1]。miRNA在多种生理过程中发挥着重要作用，包括细胞增殖、侵袭、转移以及凋亡等。最近，越来越多的临床数据表明，miRNA表达水平的失调与人类某些疾病(如癌症)密切相关，因而它们可用作潜在的癌症标志物[2]。miRNA的高灵敏度和高特异性检测，不仅在生物学研究领域引起广泛的关注，而且在多种疾病的分类、诊断以及预后方面也具有重要研究价值[3-5]。由于miRNA具有序列短、同源性高以及丰度低等特性，对其检测存在一定的难度[6]。

传统的miRNA检测方法主要有逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)[3,7]、Northern印记[8,9]、微阵列技术[10,11]等。然而这些方法存在操作繁琐、检测灵敏度低等缺点。核酸扩增作为一种现代miRNA检测方法，尤其是恒温核酸扩增，因为操作简单、反应条件温和且扩增效率高，所以备受研究者们的关注。目前已经发展了许多基于恒温核酸扩增的miRNA分析方法，这些方法根据反应过程中是否有蛋白酶参与，可以分为酶介导的恒温核酸扩增和恒温无酶核酸扩增。由于恒温无酶核酸扩增无需价格昂贵且稳定性差的蛋白酶参与，在miRNA分析方面具有良好的应用前景。本文简要介绍了一些用于miRNA检测的恒温无酶核酸扩增方法，为研究者们探索高灵敏度和高特异性的miRNA分析方法提供参考。……