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激光共聚焦扫描成像-荧光相关光谱系统的研究及其应用

2020-11-11董辰博李福才董朝青任吉存

分析科学学报 2020年5期
关键词:检测系统

董辰博,李福才,董朝青,蔡 萍*,任吉存*

(1.上海交通大学电子信息与电气工程学院,上海 200240;2.上海交通大学化学化工学院,上海 200240)

荧光相关光谱(Fluorescence Correlation Spectroscopy,FCS)是通过测定极小检测微区内荧光分子因布朗运动产生的荧光信号涨落,并对涨落信号进行相关函数统计分析后,从而获得荧光相关光谱曲线的一种单分子光谱方法[1]。基于对一路涨落信号的自相关分析、两路涨落信号间的互相关分析及三路涨落信号间的多元相关分析,荧光相关光谱可以分为自相关光谱(FACS)、互相关光谱(FCCS)和三元相关光谱(FTCS)等[2-7]。

上世纪70年代,Magde、Elson和Webb等人提出了FCS概念和理论,但由于当时检测技术的限制,FCS方法发展非常缓慢。1993年,Rigler等人将激光共聚焦技术引入FCS系统,显著地减小了FCS检测体积,极大地提高了FCS检测的信噪比,真正实现了单分子检测的目标。目前,荧光相关光谱被广泛地用于活细胞内生物分子的浓度、扩散动力学、酶的活性及分子相互作用研究,被认为是活细胞原位研究的重要手段之一。国际上著名的光学显微成像公司如蔡司、徕卡及奥林帕斯等公司均推出了相应FCS仪器。遗憾的是目前国内还没有具有细胞扫描成像-荧光互相关光谱分析功能的国产仪器。

近二十年来,我们课题组一直从事于在荧光相关光谱的理论、方法和应用研究工作[3,4,8-12]。本文基于我们在荧光相关光谱研究中获得的某些关键技术,研制了一套细胞扫描成像-荧光互相关光谱联用系统,该系统具有高分辨活细胞成像和原位分析功能。……

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